[发明专利]化学‑酶法制备熊去氧胆酸在审
| 申请号： | 201710052978.6 | 申请日： | 2017-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN106701882A | 公开（公告）日： | 2017-05-24 |
| 发明（设计）人： | 竺伟;高新星 | 申请（专利权）人： | 尚科生物医药（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12P33/06 | 分类号： | C12P33/06;C12P33/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 化学 法制 备熊去氧 胆酸 | ||
1.一种化学-酶法制备熊去氧胆酸(化合物I)的方法，其特征在于，合成路线如下：
反应步骤包括：
步骤a：去氧胆酸(化合物II)在12α-羟基类固醇脱氢酶(12α-HSDH)、辅酶、第一辅酶再生体系、磷酸盐缓冲液的作用下发生氧化反应得到12-酮去氧胆酸(化合物III)；
步骤b：化合物III进行脱羰基还原反应得到胆石酸(化合物IV)；
步骤c：化合物IV在7α-羟化酶(7α-LCAH)催化作用下进行羟基化反应得到熊去氧胆酸(化合物I)。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中所述辅酶为NAD或NADP。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中所述第一辅酶再生体系为醇脱氢酶/丙酮体系或乳酸脱氢酶/丙酮酸体系。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中化合物II的浓度为20～100g/L，12α-羟基类固醇脱氢酶的浓度为5～10g/L，丙酮浓度为5～20％(V/V)，辅酶的浓度为0.01～0.1g/L，醇脱氢酶的浓度为1～5g/L，磷酸盐缓冲液的浓度为40～80mM。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b中所述脱羰基还原反应在180℃～220℃、水合肼作用下进行，其中所述水合肼与化合物III的摩尔比为1:1～1:3。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤c中所述羟基化反应是将化合物IV、
7α-LCAH、辅酶、第二辅酶再生体系、磷酸盐缓冲液按一定比例混合反应得到。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述第二辅酶再生体系为醇脱氢酶/异丙醇体系。
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