[发明专利]具有BRD4抑制活性的化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种来自海洋真菌的具有BRD4抑制活性的化合物及其制备方法和应用，该化合物的结构如式I所示，该化合物具有显著的BRD4抑制活性，可用于制备治疗与细胞增殖过度或异常相关的如血癌、乳腺癌以及结肠癌等疾病的药物，本发明提供的化合物在抗病毒方面也具有潜在的应用价值，可用于制备治疗HIV等疾病的药物。本发明还公开了具有BRD4抑制活性的化合物的制备方法，由海洋真菌经固体发酵培养产生，可通过对发酵产物进行乙酸乙酯或二氯甲烷萃取后，再用硅胶柱层析和反相色谱分离纯化得到，易于操作和实施。

技术领域

本发明涉及具有BRD4抑制活性的化合物技术领域，具体涉及一种具有BRD4抑制活性的化合物及其制备方法和应用。

背景技术

海洋真菌由于其次生代谢产物的化学多样性丰富、产量高而成为海洋天然产物研究的一类重要的生物资源。到目前为止，已从海洋真菌的发酵产物中发现了1,117个新的次生代谢产物，这些代谢产物表现出良好的抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗病毒等生物活性(SchuppPJ,Kohlert-Schupp C,Whitefield S,et al.Cancer chemopreventive and anticancerevaluation of extracts and fractions from marine macro-and microorganismscollected from Twilight Zone waters around Guam.Natural ProductCommunications.2009；4:1717-1728)。

Brd(Bromodomain)是一类能够特异性识别组蛋白中乙酰化赖氨酸的保守蛋白结构域，又称溴结构域蛋白，其通过与乙酰化赖氨酸结合促使染色质重塑因子和转录因子等相关蛋白富集在特定的基因转录位点，调节基因的转录表达。Brd4蛋白是溴结构域蛋白家族中的一员，研究显示，Brd4蛋白除了能够通过与组蛋白的乙酰化赖氨酸结合进而调节细胞周期和生长之外，还具有一定的激酶活性，如Brd4能够直接导致RNA拓扑异构酶II的C端磷酰化。

在肿瘤发生发展方面，大量研究表明，Brd4蛋白与多种肿瘤的密切联系，比如睾丸中的核蛋白基因染色质与Brd4的编码区形成融合型原癌基因导致中线癌发病；黑色素瘤细胞会表达较多的Brd4蛋白帮助其增殖，抑制Brd4可以使黑色素瘤细胞的生长明显放慢；恶性外周神经鞘膜瘤细胞会异常高度表达Brd4蛋白，抑制Brd4会导致该肿瘤细胞的死亡；肝癌组织表达比正常组织高的Brd4，而抑制Brd4可以抑制肝癌细胞的增殖作用；在造血系统肿瘤包括AML、Burkitt淋巴瘤、多发性骨髓瘤、B细胞急性淋巴性白血病的模型中，通过干扰Brd4余癌基因MYC的结合，可以抑制癌基因MYC的表达等。

BRD蛋白是一种进化上高度保守的约含110个氨基酸的溴蛋白质功能结构域，通过染色质的组装和乙酰化而参与信号依赖的、非基础性的基因转录调控。BRD蛋白亦可通过对转录因子等非组蛋白的乙酰化修饰而广泛参与细胞周期调控、细胞分化、信号转导等过程(Conway SJ.Bromodomains:Are readers right for epigenetic therapy？ACSMedicinal Chemistry Letters.2012；3:691-694)。BRD4蛋白是BRD蛋白家族的一部分，研究表明，BRD4蛋白是与肿瘤和HIV潜伏密切相关的靶点(Muller S,Filippakopoulos P,Knapp S.Bromodomains as therapeutic targets.Expert Reviews in MolecularMedicine.2011；13:e29.Zhou M,Huang K,Jung KJ,et al.Bromodomain protein Brd4regulates human immunodeficiency virus transcription through phosphorylationof CDK9at threonine 29.Journal of Virology.2009；83:1036-1044)。因此，发现新的BRD4小分子抑制剂对于抗肿瘤和抗HIV潜伏的新药开发具有重要的社会和经济意义。