[发明专利]升麻提取物和两种升麻酮碱及制备方法与用途

说明书

本发明提供一种升麻提取物及两种升麻酮碱，以升麻属植物为原料，用有机溶剂提取后，经溶剂萃取或色谱分离，可得到升麻提取物以及两种升麻酮碱的纯品，两种升麻酮碱分别为升麻酮碱甲和升麻酮碱乙。该提取物及两种升麻酮碱能有效抑制人肺癌细胞系A549、人胃癌细胞系MKN7、GSU、人黑色素瘤细胞系A375、人肺腺癌细胞系NCI‑H1975、人结肠癌细胞系Colo‑205和人白血病细胞系HL‑60等株肿瘤细胞系的增殖生长，尤其升麻酮碱甲和升麻酮碱乙的半数致死量在1.36‑21.09μM的浓度范围，表明具有显著的抗肿瘤活性。可在制备抗肿瘤药物中的应用。升麻酮碱甲(1)和升麻酮碱乙(2)的结构式如下：

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种以升麻属植物为原料制备的升麻提取物及两种新升麻酮碱的方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

升麻属（Cimicifuga）植物为多年生草本，常生于海拔2000米左右的山地林缘、林中或路旁草丛中，主要分布于北美洲、亚洲和欧洲北温带地区。其中升麻在我国是著名的常用中药，黑升麻（C. racemosa，black cohosh）是被欧美社会高度认知的保健药品和膳食补充剂。《中国药典》2015版一部规定升麻Cimicifuga Rhizome为升麻 C. foetida、兴安升麻C. dahurica、大三叶升麻C. heracleifolia的干燥根茎。关于升麻的最早的记载来自公元前25-220年左右的《神农本草经》，并被列为“上品”药材。升麻地下根茎入药，其功效为主解百毒，辟瘟疾瘴邪毒蛊和升阳举陷。临床上主要用于治疗风热表征、风热头痛，齿痛，口疮，咽喉肿痛，麻疹不透，阳毒发斑；脱肛，子宫脱垂等病症。

前期研究发现，升麻属植物中含有cycloartane型三萜、3-异戊二烯基吲哚等物质，但目前尚未发现高度不饱和共轭体系的3-异戊二烯基吲哚二聚体类生物碱（升麻酮碱），更未见升麻属植物中该类生物碱的抗肿瘤细胞毒活性报道。

发明内容

本发明的目的是提供具有抗肿瘤活性的一种升麻提取物，通过以下步骤实现：将升麻属植物根茎切成薄片，干燥粉碎后按药材/溶剂（重量/体积比）加入8-12倍量有机溶剂，室温浸提或回流提取2-3次。合并提取液，减压浓缩得浸膏，用适量水将此浸膏混悬溶解，用中低极性有机溶剂等体积萃取，回收溶剂得到浸膏。浸膏上大孔树脂柱，收集70-95%洗脱部分，干燥得到升麻提取物。

该提取物中主要含有双聚吲哚类生物碱单体，即两种升麻酮碱，分别为升麻酮碱甲Cimicifoetone A（化合物1）和升麻酮碱乙Cimicifoetone B（化合物2），通过以下步骤获得：将升麻提取物再经过硅胶色谱、Sephadex LH-20 柱纯化得到两个部分，然后分别用有机溶剂结晶得到升麻酮碱甲和乙的纯品。

提取、结晶所用的有机溶剂包括甲醇、乙醇、含水醇以及乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷等常见中低极性有机溶剂系统。萃取所用的中低极性有机溶剂包括石油醚、己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷。大孔树脂柱包括D101、AB-8等常见型号树脂材料。

所述的升麻属植物，包括升麻 C. foetida、兴安升麻C. dahurica、大三叶升麻C. heracleifoli、北美黑升麻C. racemosa 、单穗升麻C. simplex、云南升麻C. yunnanensis、短果升麻 C. brachycarpa、南川升麻C. nanchuanensis、小升麻C. acerina等升麻属植物。