[发明专利]一种应用角质酶变温催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法有效
申请号: | 201710063498.X | 申请日: | 2017-02-03 |
公开(公告)号: | CN106636260B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 夏咏梅;邢海根;方云;孙景文;王海军 | 申请(专利权)人: | 江南大学;山东海根生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P19/56 | 分类号: | C12P19/56 |
代理公司: | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张勇<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用 角质 酶变温 催化 莱苞迪苷 制备 方法 | ||
1.一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,以来源于嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)的角质酶,催化莱苞迪苷B与槐糖的酯化反应,酯化反应过程中分阶段降低反应温度;所述方法具体为:以莱苞迪苷B和槐糖为底物,将此底物用溶剂配制成10-20g/L的反应液;55℃下加入来源于嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)的角质酶,搅拌均匀后升温至70℃反应0.5-1h,补加10-20g/L的莱苞迪苷B,再在60℃下反应1-1.5h后补加30-50g/L的莱苞迪苷B,在60℃下继续反应2-6h。
2.根据权利要求1所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,反应方程式如下:
3.根据权利要求1所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,所述槐糖的用量为与总的莱苞迪苷B的用量等化学剂量比。
4.根据权利要求1-3任一所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,所述角质酶是酶液、粉末状酶制剂或固定化酶。
5.根据权利要求4所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,所述固定化酶的固定方法是物理、化学或生物方法。
6.根据权利要求3所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,所述溶剂为加有pH 6.0的磷酸缓冲液的甲醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合;其中pH 6.0的磷酸缓冲液的加入量为溶剂质量的0.01%-0.05%。
7.根据权利要求3所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,每克莱苞迪苷B对应的角质酶的用量为100-500U。
8.根据权利要求3所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,反应停止后,将反应液减压蒸出溶剂后,用90%甲醇水溶液将反应混合物重结晶2到3次即得到白色产品莱苞迪苷D。
9.根据权利要求3所述的一种催化莱苞迪苷B制备莱苞迪苷D的方法,其特征在于,60℃下反应至莱苞迪苷B转化率为60%后,加入4A分子筛脱除部分水;继续反应,当莱苞迪苷B转化率达到70%-78%,停止加热,将反应液减压蒸出溶剂后,用90%甲醇水溶液将反应混合物重结晶2到3次即得到白色产品莱苞迪苷D。
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