[发明专利]一种鼓槌石斛的质量检测方法

说明书

本发明公开鼓槌石斛的质量检测方法，包括：1)以ITS‑26SE和ITS‑17SE为引物，进行测序，以鉴定待测石斛药材的品种；2)对样本容量为n的样本进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；3)对样本分别进行指纹图谱检测，获取鼓槌石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；4)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中的其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，通过Lasso方法筛选变量建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱模型。通过一代测序及特征指纹图谱，精确地鉴别和控制鼓槌石斛药材的质量。

技术领域

本发明属于中药成份检测分析领域，具体涉及一种鼓槌石斛的质量检测方法。

背景技术

鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindley)：茎直立，肉质，纺锤形，长6cm～30cm，中部直径1.5cm～5cm，具2节～5节间，具多数圆钝的条棱，干后金黄色，近顶端具2枚～5枚叶；叶不下延为抱茎的鞘。总状花序从近茎顶端发出。斜出或稍下垂，长达20cm；花序轴粗壮，疏生多数花；花序柄基部具4枚～5枚鞘；花苞片小，膜质，卵状披针形，长0.2cm～0.3cm，先端急尖；花梗和子房黄色，长达5cm；花质地厚，金黄色，稍带香气；中萼片长圆形，长1.2cm～2cm，中部宽0.5cm～0.9cm，先端稍钝，具7条脉；侧萼片与中萼片近等大；萼囊近球形，宽约0.4cm；花瓣倒卵形，等长于中萼片，宽约为萼片的2倍，先端近圆形，具约10条脉；唇瓣颜色比萼片和花瓣深，近肾状圆形，长约2cm，宽2.3cm，先端浅2裂，基部两侧多少具红色条纹，边缘波状，上面密被短绒毛；唇瓣通常呈倒V型隆起，有时具U形的栗色斑块；蕊柱长约0.5cm；药帽淡黄色，尖塔状。鼓槌石斛的茎可以入药，具有养阴生津，止渴，润肺。用于热病伤津，口干烦渴，病后虚热。

石斛一直被人们视为珍贵的中草药，具有十分重要的滋补功效。在临床上，石斛被用于治疗多种疾病，具有增强免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌症等药理功效。由于人为长期无节制采挖及不合理利用石斛，其野生资源日趋减少，市场上出现了一些以假乱真、以次充好的现象。此外，由于石斛品种较多，其品种间的杂交使得其近缘的种存在性状交叉现象，分类区别比较困难。因此，有必要建立石斛的特征指纹图谱对石斛的药材质量进行评价。

色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，作为一种全局分析的全景模式，反映的是样品的整体情况。但在色谱指纹图谱分析过程中，很多数据都是高维的，即数据包含很多属性或特征，比如有关鼓槌石斛色谱指纹图谱，就能更好地对鼓槌石斛进行描述，但在实际应用中对高维数据直接进行操作将会面临“维数灾难”的问题，“维数灾难”会导致建模过程所需要的样本数随着维数升高而呈指数级增长。面对高维数据，常规的最小二乘方法不再适用，为了提高模型的可解释性和预测的准确度，变量选择变得很重要。如何高效地从众多的变量中筛选出对因变量有重要作用的若干个变量，是在对指纹图谱进行分析时亟需解决的问题。

目前国家药典采用定量测定中药材中某一活性成分或有效成分即小分子成分的含量的高低来评价其质量。但研究证明，中药的疗效是来自其多种“活性成分”之间的协同作用，甚至是被普遍公认的有效的“活性成分”与“非活性成分”之间的协同作用或“生克作用”才能达到中药的疗效，而不是某一活性成分单独作用的结果。在中医理论指导下的中药，任何一种活性成分均不能全面反映中医用药所体现的整体疗效。

发明内容

本发明提供了一种鼓槌石斛的质量检测方法，通过一代测序鉴定石斛药材的品种，利用Lasso方法筛选变量建立鼓槌石斛中的化学小分子成分的相关特征指纹图谱模型，通过一代测序和相关特征指纹图谱模型准确评价鼓槌石斛的药材的质量。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种鼓槌石斛的质量检测方法，包括：

1)以ITS-26SE：5’GAATTCCCCGGTTCGCTCGCCGTTAC 3’；