[发明专利]一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法

权利要求书

1.一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)构建如下组成的葡糖苷酶多拷贝表达盒：启动子序列-信号肽1编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列-连接序列-启动子序列-信号肽2编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列-连接序列-启动子序列-信号肽3编码序列-葡糖苷酶编码序列-终止子序列；所述的启动子序列、信号肽1编码序列、葡糖苷酶编码序列、终止子序列、连接序列、信号肽2编码序列、信号肽3编码序列分别如SEQ ID NO.1-7所示；

(2)在葡糖苷酶多拷贝表达盒两端加入限制性内切酶识别位点序列，通过限制性内切酶、DNA连接酶将表达盒构建到表达载体上；

(3)将构建的重组表达载体转化到里氏木霉中，转化有重组载体的里氏木霉菌株纤维素酶酶活得到提高。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的表达载体为pCAMBIA1300。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的限制性内切酶为EcoRI和PmeI。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)通过农杆菌将构建的重组载体转化到里氏木霉中。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)中所述的里氏木霉为里氏木霉ATCC24449。

6.一种里氏木霉菌株，其特征在于：为权利要求1-5中任一项所述的转化有重组载体的里氏木霉菌株。