[发明专利]氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用

说明书

技术领域

本发明专利涉及化工有机分析技术领域，具体是氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法及在烟叶分析中的应用。

背景技术

氟氰戊菊酯是一种广谱性拟除虫菊酯类杀虫剂，近年来在我国已被广泛应用于预防烟草害虫。

按中国农药毒性分级标准，氟氰戊菊酯及其结构类似物属于低毒杀菌剂，雄性大鼠急性经口 LD₅₀为81mg/kg，雌性为67mg/kg。超标使用必然会导致烟草制品及食品的安全出现隐患，相关检测部门给予高度的重视。

氟氯戊菊酯及其结构类似物对于人体有不良干扰作用。这些物质主要导致：

⑴损害神经系统；

⑵皮肤黏膜刺激性伤害。

由于烟草成分复杂，致使干扰成分增加，而分析物处于痕量状态，样品前处理（分离待检物）成为安全分析的关键步骤。目前传统的样品前处理技术存在处理时间长、操作繁琐、选择性差等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种氟氯戊菊酯分子印迹固相萃取柱的制备方法，克服了现有固相萃取方法的不足，应用于烟叶中氟氯戊菊酯及其结构类似物残留分析中。

本发明技术方案步骤如下：

a、选取氟氰戊菊酯与α-甲基丙烯酸的摩尔配比为1:6；将模板分子氟氰戊菊酯0.1mmol和功能单体α-甲基丙烯酸MAA0.6mmol，放入50mL的安瓿瓶中；

b、安瓿瓶中加入18mL四氢呋喃使其反应，振摇；

c、将在b步骤得到的溶液中再加乙二醇二甲基丙烯酸酯EDMA 8mmol和偶氮二异丁腈AIBN 0.03g；超声1h后，通入N₂ 脱氧15min后，抽真空1min后密封；

d、将步骤c得到的反应体系在60℃的恒温水浴中静置15h，得块状白色固体氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；

e、将步骤d中所得印迹聚合物经研磨、粉碎，过200目筛，再用去离子水沉降聚合物3次除去过细粉末；将最终得到的MIP颗粒用甲醇:乙酸（体积比95:5）洗脱至无模板分子，最后用甲醇浸泡1h除去残留的乙酸，洗脱后的聚合物放入真空干燥器中，40℃条件下，干燥10h，得到具有特异性识别的氟氰戊菊酯分子印迹聚合物MIP；

f、称取步骤e中所制备的分子印迹聚合物MIP100g，溶于水中装入内径为1.5cm的固相萃取空柱内，用固相萃取装置将水抽出后，再用水淋洗柱子，最后在上端再加上少许脱脂棉，轻轻挤压使柱子填充紧实备用，即制备成氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱。

进一步，所述的致孔剂为四氢呋喃。

进一步，所述的交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯。

进一步，所述引发剂为偶氮二异丁腈。

一种采用上述方法制备的氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱在烟叶分析中的应用，具体步骤如下：

a、绘制氟氰戊菊酯的线性关系曲线及检测限

将氟氰戊菊酯分别配制成质量浓度为200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μg/mL的一系列标准溶液，绘制氟氰戊菊酯的线性关系曲线；

氟氰戊菊酯的线性关系及检测限

b、新鲜烟叶样品前处理

称取5.000 g新鲜烟叶样品，捣碎，加入6.000 g无水硫酸钠，用以除去样品中过多的水分，加入10 mL四氢呋喃混匀，超声15 min，于4000 r/min离心10 min，收集分离液；再加入10 mL四氢呋喃混匀，超声15 min，于4000 r/min离心10 min，收集分离液与头次分离液合并，过氟氰戊菊酯分子印迹固相萃取柱，用20 mL水淋洗，待排净淋洗液后，用10 mL甲醇洗脱，收集洗脱液留待色谱检测；

c、色谱检测条件

色谱柱：agela C18（4.6×150 mm，5 μm），检测波长200nm，流动相为甲醇-水，甲醇：水体积比为90:10，流速1 mL/min，柱温为25℃，进样量20 µL；

d、分析检测结果

利用利用a步骤绘制的氟氰戊菊酯的性关系曲线线性关系曲线分析色谱检测结果。

本发明采用本体聚合方法制备氟氯戊菊酯分子印迹聚合物，所制备的聚合物经研磨、漂洗、过筛、洗脱、干燥等一系列处理后，再经高效液相色谱法对其进行评价分析即可得到具有特异性吸附效果的聚合物材料，并制备成分子印迹固相萃取柱，用于样品净化，对烟叶中氟氯戊菊酯进行分离和富集，用于对氟氯戊菊酯的检测分析。

本发明的设计思路为：