[发明专利]一种血红蛋白的检测方法及血红蛋白检测试剂盒

权利要求书

1.一种血红蛋白的检测方法，其特征在于：采用免疫夹心法进行检测，具体步骤如下：标记有胶体金颗粒的第一抗体结合血液中释放的血红蛋白后，借助毛细作用力向前层析，层析至硝酸纤维素膜包被的第二抗体时，形成“胶体金颗粒-抗体-抗原-抗体”的复合体系，并且聚集于硝酸纤维素膜上，胶体金颗粒大量聚集时可形成紫红色的信号，通过仪器能够准确定量判读检测信号的强度，从而实现定量检测,所述第一抗体为抗人血红蛋白抗体，第二抗体为配对的血红蛋白抗体，所述第一抗体和第二抗体可同时结合于目标抗原的不同表位，从而形成复合体系。

2.一种实现权利要求1所述检测方法的血红蛋白检测试剂盒，其特征在于：包括由血红蛋白检测试纸、外置卡壳、样本裂解液以及内设了相应标准曲线和判定方法的IC卡，其中，

所述血红蛋白检测试纸，宽度为3-5mm，长度为7-8cm，所述检测试纸由含有胶体金标记的抗人血红蛋白抗体的胶体金垫、包被有T线和C线的硝酸纤维素膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成，所述T线为配对的血红蛋白抗体，C线为抗鼠IgG，所述抗人血红蛋白抗体作为第一抗体标记有胶体金颗粒，样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端；

所述外置卡壳，包含上盖和下盖，两条所述血红蛋白检测试纸平行放置于所述下盖内部，所述上盖对应样品垫部分设置有样品孔，用于加入样本和稀释液，上盖对应硝酸纤维素膜中部位置设置有视窗口，用于观察硝酸纤维素膜上的C线、T线，判定结果；

所述样本裂解液，主要配方为：0.02M Tris-HCL，0.15molNaCL，1％Triton100调节PH至7.4；

所述IC卡，为内置了标准曲线和判定方法的IC卡，该IC卡配套使用NS3001B型免疫层析结果判读记录仪使用，用于对检测结果的定量判定，对血红蛋白检测范围为50-250g/L。

3.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述吸样垫为吸水滤纸。

4.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述包被有配对抗体的硝酸纤维素膜的制备方法为：以0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液将配对的血红蛋白抗体配制成终浓度1-2mg/mL，将喷膜仪在硝酸纤维素膜上以1.2-1.4ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在硝酸纤维素膜上部包被1-2mg/ml的抗鼠IgG，作为C线，干燥，备用。

5.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述胶体金垫的制备方法为：取100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M K₂CO₃调至pH7.0-8.0，再加入1-2mg标记用血红蛋白抗体，室温搅拌1小时，封闭，12000rpm离心30分钟，弃上清，用工作液复溶至60ml，然后用喷金机分别均匀地喷涂在无纺布或玻纤上，干燥备用。