[发明专利]一种抗枯萎病生物有机肥及其制备方法在审
申请号: | 201710087215.5 | 申请日: | 2017-02-17 |
公开(公告)号: | CN106748300A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 胡伟 | 申请(专利权)人: | 湖南科技大学 |
主分类号: | C05G3/00 | 分类号: | C05G3/00;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 北京国昊天诚知识产权代理有限公司11315 | 代理人: | 许志勇 |
地址: | 41120*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 枯萎病 生物 有机肥 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗枯萎病生物有机肥,其特征在于,按照质量份包括以下组分:有机肥50-150份和含菌沸石粉1份。
2.根据权利要求1所述的抗枯萎病生物有机肥,其特征在于,所述有机肥为非动物源原料发酵有机肥,所述非动物源原料发酵有机肥总无机养分不高于6%,有机质大于30%,pH为5.0-8.5,水分小于等于30%。
3.根据权利要求1所述的抗枯萎病生物有机肥,其特征在于,所述含菌沸石粉通过以下方法制备得到:将沸石粉碎并过100目筛,150-200℃干热灭菌20-60min后冷却,将灭菌后的沸石与AF11b菌液按照质量体积比(g/mL)为1:10-2:1的比例放入搅拌机内进行混合,搅拌速度为30-90转/min,混合时间为20-40min,静置6-18h后去除上清液,将沉淀取出烘干,烘干温度为40-80℃,时间为4-12h,烘干后的沸石进行粉碎,制备成含菌沸石粉。
4.根据权利要求3所述的抗枯萎病生物有机肥,其特征在于,AF11b菌株菌液通过以下方法制备得到:选择利福平作为菌株AF11的标记抗生素,挑选在100μg/mL浓度水平下具备拮抗效果的突变菌株作为抗性标记菌株,定名为AF11b;将菌株AF11b放置于32℃培养箱24h活化,将活化好的菌株放入10L-50L-500L三级自动发酵罐中进行扩繁,培养基采用细菌培养基;扩繁中温度控制在30-35℃之间,当菌液OD600值大于等于0.9时,发酵终止;制备得到菌株AF11b菌液,其中,细菌培养基具体为:每L培养基中含蛋白胨10g、酵母提取物5g和氯化钠10g。
5.一种抗枯萎病生物有机肥的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、制备菌株AF11b菌液;
步骤2、制备含菌沸石粉;
步骤3、将有机肥与含菌沸石粉按质量比为50-150:1混合均匀后装入封口袋中,28℃恒温保存,保存时间不得低于90d,制备得到抗枯萎病生物有机肥。
6.根据权利要求5所述的抗枯萎病生物有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤1中制备菌株AF11b菌液具体为:选择利福平作为菌株AF11的标记抗生素,挑选在100μg/mL浓度水平下具备拮抗效果的突变菌株作为抗性标记菌株,定名为AF11b;将菌株AF11b放置于30-25℃培养箱20-28h活化,将活化好的菌株放入10L-50L-500L三级自动发酵罐中进行扩繁,培养基采用细菌培养基;扩繁中温度控制在30-35℃之间,当菌液OD600值大于等于0.9时,发酵终止;制备得到菌株AF11b菌液。
7.根据权利要求6所述的抗枯萎病生物有机肥的制备方法,其特征在于,所述细菌培养基具体为:每L培养基中含蛋白胨10g、酵母提取物5g和氯化钠10g。
8.根据权利要求5所述的抗枯萎病生物有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤2中制备含菌沸石粉具体为:将沸石粉碎并过100目筛,150-200℃干热灭菌20-60min后冷却,将灭菌后的沸石与AF11b菌液按照质量体积比(g/mL)为1:10-2:1的比例放入搅拌机内进行混合,搅拌速度为30-90转/min,混合时间为20-40min,静置6-18h后去除上清液,将沉淀取出烘干,烘干温度为40-80℃,时间为4-12h,烘干后的沸石进行粉碎,制备成含菌沸石粉。
9.根据权利要求5所述的抗枯萎病生物有机肥的制备方法,其特征在于,所述有机肥为非动物源原料发酵有机肥,所述非动物源原料发酵有机肥总无机养分不高于6%,有机质大于30%,pH为5.0-8.5,水分小于等于30%。
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