[发明专利]一种自交联透明质酸钠及其制备方法

说明书

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种自交联透明质酸钠及其制备方法。本发明的制备方法包括下列步骤：将透明质酸钠溶解在溶剂中，在碱性条件下加入偶联剂(零长度交联剂)后进行偶联反应，然后用生理盐水清洗，再用有机溶剂沉淀，经过滤、洗涤及真空干燥，获得目标产品。通过上述方法制得的自交联透明质酸钠的溶解性好，同时可以避免交联剂的毒性以及因由交联剂引起的聚合物结构改变而导致的生物相容性降低。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种自交联透明质酸钠及其制备方法。

背景技术

透明质酸是一种由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基-D-氨基葡萄糖以糖苷键交替连接而成的线性粘多糖。透明质酸是一种生物可吸收可降解的聚合物，具有独特的黏性和流变学性质。透明质酸具有很强的润滑作用，是许多人体组织的重要组成部分。透明质酸可以在透明质酸酶和自由基的作用下发生降解，因此限制了透明质酸作为生物材料的应用。同时，透明质酸水凝胶的物理性质过于柔软，导致其作为生物材料在体内使用时无法提供足够的支撑。

化学交联是增强透明质酸结构稳定性的有效方法。目前，主要通过使用双官能团交联剂向透明质酸分子中引入交联结构。双官能团交联剂大多为高反应活性的化学试剂，常见的有戊二醛、丁二烯、双环氧化合物(如1,4-丁二醇二缩水甘油醚和1,2,7,8-二环氧辛烷)等。透明质酸的羧基在双官能团交联剂的作用下活化，进而发生交联反应，交联化的透明质酸能够显示出较高的生物稳定性。然而，双官能团交联剂本身具有一定毒性，同时由交联剂连接的透明质酸聚合物的生物相容性和溶解性有所降低，因此限制了该方法的应用。

发明内容

针对现有技术中由双官能团交联剂介导的交联透明质酸的毒性大、生物相容性低、溶解性差等问题，本发明旨在提供一种自交联透明质酸钠及其制备方法。本发明利用偶联剂(又称零长度交联剂)来催化透明质酸钠分子内/分子间的酯化反应，得到自交联透明质酸钠。相比于由双官能团交联剂介导的交联透明质酸钠，自交联透明质酸钠在毒性、生物相容性和溶解性等方面均得到改善和提高。

具体而言，本发明采用如下技术方案：

一种自交联透明质酸钠的制备方法，其包括下列步骤：将透明质酸钠溶解于溶剂中，加入碱性物质并将溶液的pH值调节至7～14，然后加入交联剂并于-5～50℃反应2～8小时；反应完毕后，采用生理盐水洗涤，然后采用有机溶剂沉淀，经过滤、漂洗及真空干燥，得到自交联透明质酸钠。

在一项优选的技术方案中，所述透明质酸钠为无菌干粉，其分子量为3.0×10⁵～2.5×10⁶Da。

在一项优选的技术方案中，所述溶剂为极性非质子溶剂，所述极性非质子溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基亚砜(DMSO)中的任意一种，优选N-甲基吡咯烷酮。

在一项优选的技术方案中，所述透明质酸钠与所述溶剂之间的用量比为1g:10～10000mL，优选1g:40mL。

在一项优选的技术方案中，所述碱性物质选自氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、三乙胺(TEA)中的任意一种，优选三乙胺。

在一项优选的技术方案中，所述偶联剂选自2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物(CMPI)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)、二环己基碳二亚胺(DCC)、N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)中的任意一种，优选2-氯-1-甲基吡啶碘化物。

在一项优选的技术方案中，所述偶联剂与所述透明质酸钠的重复单元之间的摩尔比为1:1～50，优选1:5～20。

在一项优选的技术方案中，所述有机溶剂选自丙酮、甲基叔丁基醚、异丙醚中的任意一种，优选丙酮。

在一项优选的技术方案中，所述漂洗采用丙酮/水混合溶剂来完成，其中丙酮与水之间的体积比为1～10:1，优选5:1。