[发明专利]一种用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用，属于生物检测技术领域。该功能化毛细管通过在毛细管内表面标记聚二烯丙基二甲基氯化铵，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸，达到简单、快速的进行核酸分离与提取的目的。本发明极大程度地简化了核酸分离与提取的操作过程，缩短了核酸分离与提取的时间。利用本发明的功能化毛细管进行核酸分离与提取，不需要额外的设备进行辅助，方便集成，可实现核酸自动化提取，操作简单、效率高。分离得到的核酸可直接进行原位扩增及检测。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，特别涉及一种用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用。

背景技术

基因分析技术在医疗保健、食品安全、环境监测等领域发挥了重要的作用。核酸的分离与提取是整个基因分析过程中的首要关键步骤。核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起，核酸的分离可以将其与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开，消除这些物质对于下游核酸扩增、检测的影响，从而保证基因分析的准确性。

目前商业化的核酸提取方法主要包括酚氯仿法和磁珠法。这些方法需要依赖离心机、磁力架等复杂设备配合工作，操作步骤繁琐，所用时间较长，并且有些试剂具有毒害性，这就限制了其在临床上的推广与应用。因此，亟需开发一种操作简单的、快速的且不需要额外设备辅助的核酸分离与提取装置。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种用于核酸提取的功能化毛细管。该功能化毛细管，通过在毛细管内表面标记聚二烯丙基二甲基氯化铵，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸，达到简单、快速的进行核酸分离与提取的目的。

本发明的另一目的在于提供上述用于核酸提取的功能化毛细管的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述用于核酸提取的功能化毛细管的的应用。

本发明的再一目的在于提供一种含有用于核酸提取的功能化毛细管的试剂盒。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种用于核酸提取的功能化毛细管，通过在毛细管内表面标记聚二烯丙基二甲基氯化铵(Poly Diallyldimethylammonium Chloride，PDDA)，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸。

玻璃毛细管内部含有大量羟基，带有负电性；在碱性条件下，让带有正电性的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液流过毛细管内部，在电荷的吸附作用下，使其吸附在毛细管内表面，从而使毛细管内表面带有大量的正电荷。此时，该毛细管可用于吸附分离带有负电性的核酸。原理图如图1所示。

所述的用于核酸提取的功能化毛细管的制备方法，包括以下步骤：

(1)用盐酸清洗毛细管内部；

(2)用去离子水清洗毛细管内部；

(3)用NaOH溶液清洗毛细管内部；

(4)用去离子水清洗毛细管内部；

(5)用Tris-HCl溶液清洗毛细管内部；

(6)使聚二烯丙基二甲基氯化铵(Poly Diallyldimethylammonium Chloride，PDDA)溶液流过毛细管内部；

(7)将毛细管在室温储存；

(8)用去离子水清洗毛细管内部；

(9)将毛细管置于氮气箱内干燥；得到用于核酸提取的功能化毛细管。

步骤(1)至步骤(3)及步骤(5)、(8)中所述的清洗的时间为30min～90min，优选为60min；