[发明专利]一种检测MTHFR基因突变的核酸组合及其应用和试剂盒

权利要求书

1.一种检测MTHFR基因突变的核酸组合，其特征在于，其包括SEQ ID NO.1-2所示的下游引物、SEQ ID NO.3所示的上游引物以及SEQ ID NO.4所示的捕获探针，所述下游引物的5’端或所述上游引物的5’端标记有用于结合催化酶的亲和物。

2.根据权利要求1所述的检测MTHFR基因突变的核酸组合，其特征在于，所述亲和物为地高辛、异硫氰酸荧光素和生物素中的任意一种。

3.权利要求1或2所述的检测MTHFR基因突变的核酸组合在制备用于检测MTHFR基因突变的试剂盒中的应用。

4.一种试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的检测MTHFR基因突变的核酸组合。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于将所述核酸组合的所述捕获探针固定至检测孔板的固定物，所述固定物包括导电聚合物和离子化合物；

所述导电聚合物为选自吡咯、苯胺和噻吩中的任意一种；

所述离子化合物为选自氯化钠和氯化钾中的任意一种。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括所述催化酶，所述催化酶是带有标记物的辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶，所述标记物用于与所述亲和物结合，所述标记物为地高辛抗体、异硫氰酸荧光素抗体以及链霉亲和素中的一种。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括所述催化酶的底物；

当所述催化酶为所述辣根过氧化物酶时，所述底物是TMB、ABTS和OPD中的任意一种；

当所述催化酶为所述碱性磷酸酶时，所述底物是BCIP和NBT的组合物、对硝基苯磷酸盐、4-硝基苯磷酸二钠、萘酚AS-BI磷酸盐以及萘酚-AS-MX-磷酸盐中的任意一种。

8.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括洗液A和洗液B，所述洗液A是含SDS的SSC缓冲液，所述洗液B是含Tween20的PBS缓冲液。

9.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶和Mg²⁺。