[发明专利]一种发酵生产杆菌肽的方法有效
申请号: | 201710092774.5 | 申请日: | 2017-02-21 |
公开(公告)号: | CN106893751B | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 任风芝;张雪霞;王耀耀;耿文飞;郑智慧;杨海静;高任龙;段宝玲;张炜 | 申请(专利权)人: | 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 |
主分类号: | C12P21/04 | 分类号: | C12P21/04;C12R1/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 050015 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 生产 杆菌 方法 | ||
1.一种发酵生产杆菌肽的方法,包括以下步骤:
a、制备地衣芽孢杆菌菌株的种子液
将地衣芽孢杆菌菌株的斜面培养物接种于种子培养基,28-30℃、200-240 rpm,培养20-28 h获得种子液;
其中所述的种子培养基按以下方法制得:玉米淀粉3.0-5.0克、葡萄糖10.0-20.0克、酵母粉10.0-20.0克、硫酸铵1.0-2.0克、氯化钠1.0-2.0克、七水硫酸镁1.0-1.5克,加水定容至1000mL,pH6.5-7.0,121℃灭菌30min;
b、制备地衣芽孢杆菌菌株的发酵液
将上述种子液以体积百分比6-10%的接种量接种于发酵培养基,在摇瓶或发酵罐中发酵,发酵时间72-96 h,发酵温度28-30℃,得到发酵液;
其中所述发酵培养基按以下方法制得:玉米淀粉30.0-40.0克、葡萄糖10.0-20.0克、棉籽蛋白粉15.0-30.0克、酵母粉10.0-20.0克、硫酸铵2.0-3.0克、玉米浆3.0-5.0克、磷酸二氢钾1.0-1.5克、氯化钠2.0-3.0克、七水硫酸镁1.0-2.0克,加水定容至1000mL,pH6.5-7.0,121℃灭菌30min;
其中步骤b中所述棉籽蛋白粉和酵母粉比例为3:2;
其中步骤b发酵15-25小时之间添加经过灭菌后的超顺磁性微球,所述超顺磁性微球的粒径为10-30μm,粒径分布为单分散,孔径为20-30nm,表面的功能基团为羧基基团,羧基含量为200μmol/g;
每升发酵液添加10-20g所述超顺磁性微球。
2.根据权利要求1所述的方法,步骤b中所述发酵压力为0.05±0.01Mpa、搅拌速度为300-400rpm,通气比为1:0.8-1.2vvm。
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