[发明专利]罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物的制备方法

说明书

本发明公开了一种通过正负电荷相互作用制备稳定高效的罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物的方法。通过本发明制备得到的罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物组织相容性好，制备方法简单，具有更高的生物利用度高的优点。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，更具体地，涉及一种罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物的制备方法。

背景技术

随着社会的发展，人们的生活水平不断提高，肥胖和糖尿病等“富贵病”在社会中呈现快速增长趋势。为了有效治疗这些富贵病，科研人员进行了大量的理论研究和药物开发，现阶段胰岛素仍然是应用最广泛最有效的降血糖药物。由于胰岛素的蛋白属性，口服给药无法发挥降血糖的生物活性，多数糖尿病患者需要每天频繁注射用药，给患者的日常生活带来诸多不便，而且还存在一定的过敏反应、感染等风险，严重的降低了糖尿病患者的生活质量。与传统胰岛素皮下注射给药，胰岛素口服给药是相对安全、方便、无痛的给药方式，同时，口服给药经肠道吸收后，由门静脉循环进入肝脏，更加符合胰岛素的正常生理状态。

近年来，大量的文献报道了利用多糖、聚丙烯酸、聚乳酸、磷脂等载体材料构建的口服胰岛素纳米传递系统。壳聚糖作为多糖中的一种，具有非常好的载药性和小肠吸收效率，在近期被广泛的研究和报道。但是，壳聚糖作为一种氨基多糖，本身显碱性，在制备口服胰岛素纳米复合物的过程中，对胰岛素活力产生不可逆的破坏，严重降低胰岛素的生物利用度。纵观现有的口服胰岛素纳米体系，主要存在着生物利用度低，口服胰岛素起效慢，吸收效率不稳定等需要改进的问题。

因此，开发生物相容性好的高效口服胰岛素纳米复合物，提高其生物利用度，提高口服胰岛素纳米复合物的吸收效率具有重要研究意义和临床应用价值。

发明内容

本发明拟采用改进的离子凝胶法，通过正负电荷相互作用的机理，制备稳定高效的罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物。

罗布麻酸性多糖是从罗布麻叶中提取得到的一种酸性多糖，具有羧基残基COO-,带负电荷。先前的研究表明罗布麻酸性多糖具有改善胰岛细胞活力的生物功能（一种罗布麻酸性多糖在治疗糖尿病药物中的应用，专利号ZL2013101362880）。

罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物的具体制备方法为：

S1：罗布麻酸性多糖溶液，置于磁力搅拌装置上，同时滴加胰岛素溶液和穿膜肽溶液，制备得到罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物溶液；

S2：将制备的罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物溶液中加入冻干保护剂，冷冻干燥；

S3：将冻干得到的罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物粉末分装到肠溶胶囊中备用。

罗布麻酸性多糖溶液，蒸馏水配制，浓度为0.1 mg/mL至0.3 mg/mL；

磁力搅拌装置的转速为800至1500 rpm；

胰岛素溶液，胰岛素包括猪胰岛素、牛胰岛素等动物源胰岛素，或者人工重组制备的胰岛素，用蒸馏水配制，浓度为0.5至1.0 mg/mL，用0.1M HCl调节pH值，pH值在3.5-4.6之间；

穿膜肽溶液，蒸馏水配制，浓度为0.05至0.2 mg/mL；

穿膜肽为九聚精氨酸寡肽。

胰岛素溶液滴加速度为1 mL/min至10 mL/min。

穿膜肽溶液滴加速度为1 mL/min至10 mL/min。

投药量比例（质量比）为罗布麻酸性多糖：胰岛素：穿膜肽=1：（4至8）：（0.5至2）。

冻干保护剂选用5%（w/v）海藻糖。