[发明专利]鉴定转基因植物或者转基因玉米双抗12-5外源基因插入染色体位置的方法及其应用

权利要求书

1.一种鉴定转基因玉米双抗12-5外源基因插入染色体位置的方法，所述外源基因为cry1Ab/cry2Aj基因以及G10evo基因，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(a)以转基因玉米双抗12-5和非转基因玉米昌7为亲本进行杂交，获得F1代，所述F1代自交获得F2代分离群体；

(b)从玉米数据库MaizeGDB中，随机下载大量的SSR引物，再从所述SSR引物中，筛选出与所述转基因玉米双抗12-5和所述非转基因玉米昌7存在多态性的多态性SSR引物；

(c)从所述F2代分离群体中筛选出阴性转基因个体；

(d)将所述多态性SSR引物与所述阴性转基因个体进行连锁分析，得到与所述阴性转基因个体连锁的分子标记的引物，所述分子标记的引物在染色体的位置即为所述外源基因插入染色体的位置；

所述分子标记的引物为引物umc1191和引物umc1691，

所述引物umc1191的序列为：

umc1191-F：5'-ACTCATCACCCCTCCAGAGTGTC-3'(SEQ ID NO.1)

umc1191-R：5'-AAGTCATTGCCCAAAGTGTTGC-3'(SEQ ID NO.2)

所述引物umc1691的序列为：

umc1691-F：5'-TCGTCTAAACTGCATAAAAGGGGA-3'(SEQ ID NO.3)

umc1691-R：5'-ACGGAGATAGATGCACACAAACAC-3'(SEQ ID NO.4)。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤(b)中，筛选得到的所述多态性SSR引物共85对；

步骤(c)中，所述从所述F2代分离群体中筛选出阴性转基因个体的方法采用PCR方法以及草甘膦筛选法，筛选得到的所述阴性转基因个体共29个。

3.权利要求1或者2所述的方法在转基因作物育种中的应用。

4.权利要求1或者2所述的方法在分子特征安全性评价中的应用。

5.权利要求1或者2所述的方法在转基因产品溯源中的应用。