[发明专利]一种修复酵母染色体结构异常的方法

权利要求书

1.一种修复酵母染色体结构异常的方法，其特征在于，包括：

步骤1、确认变异酵母的染色体结构异常区域；

步骤2、变异酵母染色体上，在与着丝粒最接近的染色体结构异常区域的近着丝粒端朝着丝粒方向延伸的区域插入筛选标签基因1；正常酵母染色体上，在与筛选标签基因1相对应的位置处朝着丝粒方向延伸的区域插入筛选标记标签2；所述筛选标签基因1与筛选标签基因2不同，所述正常酵母在其与变异酵母的染色体结构异常区域相对应区域上具有正常染色体；

步骤3、将不同交配型的变异酵母和正常酵母交配形成二倍体酵母，然后进行减数分裂获得四分体，对四分体进行拆分获得孢子；

步骤4、根据筛选标签基因1和筛选标签基因2分别设置对应的筛选标记培养基，将所述孢子分别接种到两种筛选标记培养基上，两种筛选培养基上均无法正常生长的孢子为已经修复的酵母。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1为通过脉冲场凝胶电泳和全基因组测序分析确认变异酵母的染色体结构异常区域。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述与着丝粒最接近的染色体结构异常区域的近着丝粒端朝着丝粒方向延伸的区域为与着丝粒最接近的染色体结构异常区域近着丝粒端朝着丝粒方向延伸100-1000bp的区域。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述在与筛选标签基因1相对应的位置处朝着丝粒方向延伸的区域为在与筛选标签基因1相对应的位置处朝着丝粒方向延伸10-100kb的区域。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述筛选标签基因1和筛选标签基因2均选自营养缺陷标签基因和抗药标签基因。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述营养缺陷标签为氨基酸缺陷标签。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述氨基酸缺陷标签选自URA、LEU和HIS。

8.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述抗药标签选自KanMX、NAT和Hyg。

9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述变异酵母为全合成型染色体的酵母，所述正常酵母为半合成型染色体酵母；所述正常酵母在变异酵母染色体结构异常区域相对应区域上具有正常的合成型染色体；所述合成型染色体与野生型染色体在每个功能基因上序列不同，但能够表达相同蛋白。