[发明专利]一种4位，7位双取代的橙皮素衍生物及其制备和作为抗类风湿关节炎的药物中的应用

说明书

本发明属于药物化学和药物治疗学领域，公开了一种4位，7位双取代的橙皮素衍生物的合成及其作为治疗类风湿关节炎的药物中的应用。研究证明，本发明中的4位，7位对氯苯乙胺双取代的橙皮素衍生物通过抑制PTCH1基因启动子的甲基化，使PTCH1蛋白表达上调，Gli1和Shh蛋白表达降低，并且炎症因子IL‑6的分泌降低。表明4位，7位对氯苯乙胺双取代的橙皮素衍生物能够发展成为治疗类风湿性关节炎的药物。

技术领域

本发明属于药物化学和药物治疗学领域，公开了一种4位和7位双取代的橙皮素衍生物的合成及其作为治疗类风湿关节炎的药物中的应用。

背景技术

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以滑膜异常增生，骨和软骨进行性破坏为特征的慢性、系统性和破坏性的自身免疫性疾病，常引起关节骨质损坏和功能障碍。我国RA患病率约为0.4％，是造成我国人群丧失劳动力与致残的主要原因之一。目前临床用于RA治疗的药物有非甾体抗炎药、甾体激素类、疾病修调药和生物制剂等，但因抗炎镇痛效果不佳或毒副作用太大而限制其使用，目前缺乏真正有效而毒副作用小的治疗药物。

野菊花(Chrysanthemum indicum L.)系一种常用的清热解毒中药，本课题组在跟踪研究野菊花黄酮类抗炎免疫作用活性成分的过程中，发现橙皮苷(又名橙皮素)是野菊花抗炎免疫作用的活性成分之一。橙皮苷来源广泛，主要分布在柑橘类植物中。橙皮苷具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌、免疫调节、防辐射、保护心血管系统等药理活性，国内外研究者对橙皮苷的研究兴趣日益增加。对人和动物实验表明，橙皮苷不会在任何器官中积累，安全、有效、无明显副作用。本实验室的前期研究发现橙皮苷灌胃给药能可提高免疫低下小鼠的脏器指数、碳廓清指数和吞噬指数，改善免疫抑制小鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应，恢复小鼠迟发型变态反应能力并能提高CD4+、CD8+细胞数；表明橙皮苷对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有促进作用。此外，我们在前期研究中证实橙皮苷灌胃给药能抑制佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的继发性炎症，与Guardia和 Kawaguchi等的报道一致，该作用与其调节AA大鼠异常的免疫功能和恢复细胞因子的网络平衡密切相关。

文献报道，黄酮等多酚类化合物都具有生物利用度较低和半衰期短的缺点，本课题组在前期药物代谢动力学研究中发现，橙皮素主要通过7位羟基与体内葡萄糖醛酸等形成葡萄糖醛酸酯或硫酸酯复合物进行代谢，导致其半衰期多(<1h)。另外通过¹HNMR实验发现橙皮素4位羰基和5位酚羟基形成稳定的分子内氢键，是否影响其与受体结合，影响生物活性，通常橙皮素的上述生物活性只有在大剂量(≥100mg/kg体重/天)才起显效。利用橙皮素直接作为治疗药物比较困难，有必要对橙皮素结构进行结构修饰，寻找生物利用度高、半衰期长、活性更高的橙皮素衍生物。

发明内容

为实现上述目的，本发明合成了一系列4位，7位双取代的橙皮素衍生物，通过抗类风湿关节炎活性筛选，发现本发明的式I化合物具有很强的抗类风湿关节炎的活性。

本发明的一个目的在于提供4位和7位双取代橙皮素类衍生物及其制备方法。

本发明另一个目的在于考察该橙皮素衍生物的化合物毒性和抗类风湿关节炎的作用机制研究。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种4位，7位对氯苯乙胺双取代的橙皮素衍生物，其结构式为：

所述的4位，7位对氯苯乙胺双取代的橙皮素衍生物的制备方法，包括以下步骤：(1)将橙皮素与2倍量的溴乙酸乙酯在弱碱作用下室温搅拌后得到7-OH取代产物；