[发明专利]应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液及其应用

权利要求书

1.一种应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液，其特征在于，基于100ml所述快速沉淀缓冲液，所述快速沉淀缓冲液包含：

碘化钠 60～75克；

十二烷基肌氨酸钠 0.25～0.5克；

脱氧胆酸钠 0.25～0.5克；

3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸0.5～1.5克；

乙酸钾 2～6克；

乙酸 1～5毫升；以及

余量去离子水。

2.一种纯化质粒DNA的方法，其特征在于，包括：

(1)将含有质粒DNA的样品与权利要求1所述应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液进行混合；

(2)将步骤(1)中所得到的混合液进行离心，并收集上清液；以及

(3)将步骤(2)中所获得的上清液进行亲和层析处理，以便获得经过纯化的质粒DNA。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述含有质粒DNA的样品是通过对含有质粒DNA的微生物进行碱裂解而获得的。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述碱裂解包括：

(a-1)将悬浮液加入所述含有质粒DNA的微生物中，以便获得第一溶液；

(a-2)将碱裂解液加入所述第一溶液中，以便获得所述含有质粒DNA的样品。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述悬浮液、所述碱裂解液和所述快速沉淀缓冲液的体积比为5:5:14。

6.根据权利要求2所述方法，其特征在于，将含有质粒DNA的样品与所述快速沉淀缓冲液进行混合1min后，将所得到的混合液进行离心，并收集上清液。

7.根据权利要求2所述方法，其特征在于，采用硅膜吸附柱进行所述亲和层析处理。

8.一种制备质粒DNA的方法，其特征在于，包括：

(1)将1～3毫升含有质粒的大肠杆菌在培养基中进行培养后，于13000转/分钟，离心1min，以便获得沉淀物；

(2)将75微升悬浮液加入所述沉淀中，涡旋振荡至沉淀完全溶解，以便获得第一溶液；

(3)将75微升碱裂解液加入所述第一溶液中，温和地上下翻转至溶液澄清，以便获得第二溶液；

(4)将210微升权利要求1所述应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液加入至所述第二溶液中，以便获得第三溶液；

(5)将所述第三溶液于13000转/分钟离心1min，以便获得上清液；

(6)将所述上清液移入硅膜吸附柱中，于13000转/分钟离心1min除去废液，加入300微升漂洗液，于13000转/分钟离心30s除去废液，加入50～100微升洗脱缓冲液，进行洗脱离心，以便获得含有质粒DNA溶液。

9.权利要求1所述应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液在制备、纯化质粒DNA中的用途。

10.一种试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1所述应用于质粒DNA提取的快速沉淀缓冲液。

11.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，进一步包括：

悬浮液；

碱裂解液；

漂洗液；以及

洗脱液。