[发明专利]一种白毛夏枯草有效物质提取方法

说明书

本发明属于化学提取分离技术领域。目的是提供一种高效的白毛夏枯草有效物质提取方法。本发明所采用的技术方案是：提取方法包括白毛夏枯草的预处理、微波灭菌、溶剂提取、分离纯化。其中，预处理包括挑选药材、抢水洗和切段；微波灭菌能够对药材进行彻底清洁并破坏植物细胞壁；分离纯化分别采用柱层析法、大孔树脂法和高效液相色谱法对木犀草素、克罗烷二萜和杯苋甾酮三种成分进行分离纯化。本发明成本低廉、效率高，能够充分提取白毛夏枯草中的多种有效成分。

技术领域

本发明属于化学提取分离技术领域，具体涉及一种白毛夏枯草有效物质提取方法。

背景技术

白毛夏枯草，又名金疮小草、筋骨草，是唇形科植物筋骨草的全株。药味苦甘，药性偏寒，具有止咳化痰、清热、凉血、消肿、解毒等作用，能够治疗气管炎、吐血、赤痢、淋病、咽喉肿痛、疔疮、痈肿等。生长于路旁、河岸、山脚下、荒地上，分布几遍全国，是一种常见的中草药。

白毛夏枯草含有新克罗烷又萜类、黄酮类和甾体类等化学成分，从中能够提取出木犀草素、克罗烷二萜和杯苋甾酮等有效成分，但由于缺乏高效的提取、纯化方法，这种资源丰富的中药材一直没有得到充分的利用。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效的白毛夏枯草有效物质提取方法。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种白毛夏枯草有效物质提取方法，包括白毛夏枯草的预处理、微波灭菌、溶剂提取、分离纯化，其具体步骤如下：

预处理：挑选9～10月采收的新鲜白毛夏枯草，以茎细、质柔韧且四棱明显者为佳；抢水洗：将白毛夏枯草投入清水，经快速洗涤后立即取出；切段：将清洗完成的白毛夏枯草切为0.6～0.9cm的小段，晒至含水量为7％～9％。

微波灭菌：放入微波灭菌机中，摊放厚度为4～6cm，灭菌完成后使之自然冷却，待温度降至室温后进行低温粉碎。

溶剂提取：在提取溶剂中加入十二烷基磺酸钠，将粉碎后的药材在提取溶剂中浸泡40～50min；对药材和溶剂进行超声处理后，加热回流并减压抽滤，滤液浓缩得到提取浸膏。

分离纯化：用水溶解提取浸膏，先后用丁酮、醋酸丁酯和石油醚进行萃取，用丁酮对水溶液进行萃取的体积比为2～4：1，用醋酸丁酯和石油醚对水溶液进行萃取的体积比例为1:1；然后将丁酮部分萃取物浓缩，过300～400目硅胶柱，用乙酸乙酯和正己烷的混合溶剂进行洗脱，得到高纯度克罗烷二萜；将醋酸丁酯部分萃取物浓缩后过大孔树脂吸附纯化得到木犀草素；将萃取后的水溶液浓缩干燥后用甲醇溶解，经高效液相色谱柱纯化得到杯苋甾酮。

优选的：所述的微波灭菌的微波频率为2000～2500MHz，时间为40～60s。

优选的：所述的低温粉碎的温度为-50～-80℃，粉碎粒度为100～200目。

优选的：所述的提取溶剂为体积分数为55％～65％的乙醇，提取溶剂与药材的质量比为5～8:1。

优选的：所述的提取溶剂中，十二烷基磺酸钠的质量百分数为0.9％～1.2％。

优选的：所述的超声功率为400～500W，时间为120s～180s。

优选的：所述的加热回流选用体积分数为60％的乙醇，在温度65～80℃条件下回流3次，每次时间2～2.5h。

优选的：所述的丁酮部分洗脱过柱洗脱剂比例为乙酸乙酯：正己烷＝7:5。

优选的：所述的大孔树脂选用AB-8，用无水乙醇溶解醋酸丁酯部分浓缩物上样，吸附条件为5～14℃，PH保持在6，解吸条件为25～33℃，解吸剂体积分数为70％的乙醇。

优选的：所述的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合相色谱柱，流动相乙腈：水比例为22:78，流速：1ml/min。