[发明专利]一种靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡及其制备与应用有效
申请号: | 201710112213.7 | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN106729777B | 公开(公告)日: | 2020-01-14 |
发明(设计)人: | 黄岳山;邓惠良;劳永华;郭圣文;黄育铭 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | A61K49/22 | 分类号: | A61K49/22;A61K9/51;A61K47/36;A61K47/42;A61K47/04;A61K47/06;A61K47/20;A61P35/00 |
代理公司: | 44245 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人: | 罗观祥 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 靶向 前列腺 癌细胞 纳米 聚糖 超声 及其 制备 应用 | ||
1.一种靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将壳聚糖、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵与3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯进行混合,加热反应,得到改性壳聚糖;向改性壳聚糖中加入前列腺抗体,采用磷酸盐缓冲溶液调节体系pH,继续反应,得到壳聚糖-前列腺特异性抗体复合物;所述pH为6.3~6.8;
2)将低沸点惰性物、壳聚糖-前列腺特异性抗体复合物与水搅拌混合,得到初乳;
3)向油相溶剂中加入分散剂和助剂,混合均匀,加入初乳,高速搅拌,加入交联剂进行固化,得到固化产物;
4)向固化产物中加入沉淀剂进行沉淀,洗涤,高速离心,将颗粒进行干燥,得到靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡。
2.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:步骤2)中所述低沸点惰性物为十二氟戊烷、氮气、八氟丙烷、六氟化硫中的一种以上;步骤3)中所述油相溶剂为蓖麻油,分散剂为吐温60;助剂为正丁醇;所述交联剂为戊二醛。
3.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:步骤1)中所述加热反应的条件为于50-60℃下反应4-8h;步骤3)中所述高速搅拌的转速为6000-10000r/min,步骤3)中高速搅拌的时间为1-2h。
4.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:步骤1)中所述壳聚糖、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵与3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯质量比为(40-60):(20-40):(20-40),所述前列腺抗体与改性壳聚糖的质量比为(80-100):30;
步骤1)中所述前列腺抗体为PSA抗体、PSMA抗体中的一种或两种。
5.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:步骤2)中所述低沸点惰性物与水相的质量比为(10-40):(5-30),所述水相为壳聚糖-前列腺特异性抗体复合物与水;
步骤2)中所述壳聚糖-前列腺特异性抗体复合物与水的质量比为(5-10):(10-25)。
6.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:
步骤3)中所述初乳中低沸点惰性物、油相溶剂和交联剂的质量比为(10-40):(30-80):(0-5);所述油相溶剂、分散剂和助剂的质量比为(30-80):(5-15):(5-15);
步骤2)中所述搅拌混合的时间为1-2h;步骤3)中所述固化的时间为2-5h;步骤4)中所述沉淀剂为异丙醇。
7.根据权利要求1所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡的制备方法,其特征在于:步骤4)中所述沉淀剂加入后需搅拌均匀,然后进行静置沉淀;所述洗涤是指分别用异丙醇、蒸馏水洗涤1-5次,步骤4)中所述高速离心的转速为6000-20000rpm;所述干燥是指冷冻干燥。
8.根据权利要求1~7任一项所述的制备方法得到的靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡。
9.根据权利要求8所述靶向前列腺癌细胞的纳米壳聚糖超声微泡,其特征在于:所述靶向前列腺癌细胞的纳米超声微泡的粒径为400-800纳米。
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