[发明专利]P‑Zn荧光探针、制备方法及在生物成像中的应用

权利要求书

1.一种P-Zn荧光探针，其特征在于，其结构如式(a)所示：

2.一种P-Zn荧光探针的合成方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：在有机溶剂中，氢化钠、四乙基2,2'–联吡啶-5,5'-亚甲基二磷酸盐和4-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-3,5-二甲基苯甲醛进行反应，得到式(a)所示P-Zn荧光探针，反应过程如反应式(I)所示：

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述氢化钠、四乙基2,2'–联吡啶-5,5'-亚甲基二磷酸盐、4-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-3,5-二甲基苯甲醛的摩尔浓度比为5-8：1-1.2：1-3。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述反应的温度为30℃-50℃。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述反应的时间为10h-15h。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂选自THF、CH₂Cl₂、CH₃OH。

7.如权利要求1所述的P-Zn荧光探针通过双光子荧光成像/荧光寿命成像在体内和/或体外检测Zn²⁺中的应用。

8.一种通过双光子荧光成像在体外检测Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将式(a)P-Zn荧光探针与Zn²⁺发生反应；

(2)双光子作为激发光进行双光子荧光成像检测，通过测定F_red/F_green(F_green＝F_460-495nm,F_red＝F_495-585nm)，来测定Zn²⁺含量。

9.一种通过荧光寿命成像在体外检测Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将式(a)P-Zn荧光探针与Zn²⁺发生反应；

(2)测定荧光寿命，通过测定所得的荧光寿命和Zn²⁺的关系，来测定Zn²⁺含量。

10.一种通过双光子荧光成像检测细胞内Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将P-Zn荧光探针和细胞共培养，使探针进入细胞；

(2)双光子作为激发光进行双光子荧光成像检测，通过测定F_red/F_green(F_green＝F_460-495nm,F_red＝F_495-585nm)，来测定Zn²⁺含量。

11.一种通过荧光寿命成像检测细胞内Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将P-Zn荧光探针和细胞共培养，使探针进入细胞；

(2)测定荧光寿命，通过测定所得的荧光寿命和Zn²⁺的关系，来测定Zn²⁺含量。

12.一种通过双光子荧光成像检测鼠脑切片Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将P-Zn荧光探针与鼠脑切片共培养；

(2)双光子作为激发光进行双光子荧光成像检测，通过测定F_red/F_green(F_green＝F_460-495nm,F_red＝F_495-585nm)，来测定Zn²⁺含量。

13.一种通过双光子荧光成像检测斑马鱼中Zn²⁺的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将P-Zn荧光探针与斑马鱼共培养；

(2)双光子作为激发光进行双光子荧光成像检测，通过测定F_red/F_green(F_green＝F_460-495nm,F_red＝F_495-585nm)，来测定Zn²⁺含量。