[发明专利]一种狼毒宁B原料药的制备方法

权利要求书

1.一种狼毒宁B的制备方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

步骤一：将瑞香狼毒干燥根粉碎，加入8-15倍量的溶剂回流提取2-4次，每次提取时间为1-3小时，合并提取液，过滤，减压浓缩，得浓缩液；所述溶剂选自甲醇、乙醇、或水与乙醇的混合物，当溶剂为水和乙醇的混合物时，混合后的乙醇浓度为10-95％；提取温度为60℃至提取溶剂的沸点温度；所制得的浓缩液密度为1.02-1.15；

步骤二：将浓缩液用有机溶剂萃取2-5次，合并有机相，回收有机溶剂，得萃取物I；所述有机溶剂为石油醚、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯或乙酸丙酯；所述有机溶剂的用量为浓缩液体积的1-3倍；

步骤三：将萃取物I用水和乙醇的混合物溶解，所述混合物混合后乙醇浓度范围为10-60％；随后依次经大孔吸附树脂柱层析和聚酰胺树脂柱层析；随后用水和乙醇的混合物进行梯度洗脱，所述混合物混合后乙醇浓度范围为5-95％；以硅胶薄层层析或HPLC检查，收集合并含有狼毒宁B的洗脱液，减压浓缩，得富含狼毒宁B浓缩液；

步骤四：将富含狼毒宁B的浓缩液，用选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丙酯或正丁醇的有机溶剂萃取，合并有机相，回收有机溶剂，得萃取物II；

步骤五：将步骤四所制得的萃取物II于二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丙酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇或其混合物下进行重结晶，随后干燥，制得狼毒宁B。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤一中，提取溶剂为水和乙醇的混合物，混合后乙醇浓度范围为50-95％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤一中，提取溶剂的用量为原料的10倍。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤二中，有机溶剂为乙酸乙酯。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤三中，大孔吸附树脂选自AB-8、D101、ADS-17、HPD100、NKA-9或DM-301；聚酰胺树脂选自醇溶性聚酰胺树脂或苯溶性聚酰胺树脂。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤四中，有机溶剂为乙酸乙酯。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤五中，重结晶的溶剂为乙酸乙酯或乙醇或其混合物；干燥方式为减压干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。