[发明专利]cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法在审
| 申请号： | 201710116455.3 | 申请日： | 2017-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN106867995A | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 岳磊;宋礼华;杨楠;宋社吾;饶海军;华晓君 | 申请（专利权）人： | 安徽安科生物工程（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B40/06;C40B50/06;C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 合肥诚兴知识产权代理有限公司34109 | 代理人： | 汤茂盛 |
| 地址： | 230088 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cfdna 接头 引物 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于cfDNA建库的接头，其特征在于，所述接头包括单链接头A和双链接头B；
所述单链接头A的序列为SEQ ID NO.1，且3′端用生物素修饰；
所述双链接头B包括接头B1和接头B2，所述接头B1和接头B2的序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。
2.一种用于cfDNA建库的引物组，其特征在于，所述引物组包括SEQ ID NO.4-6所示的序列。
3.一种cfDNA建库试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的接头和权利要求2所述的引物组。
4.如权利要求3所述的cfDNA建库试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括单链连接酶和用于单链连接酶的缓冲液。
5.如权利要求3所述的cfDNA建库试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括T4DNA聚合酶和用于T4DNA聚合酶的缓冲液。
6.一种cfDNA建库的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性，得单链cfDNA；
(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A，得3′端被修饰的单链连接产物；
(3)单向扩增第一次连接产物，得双链cfDNA；
(4)连接双链cfDNA与双链接头B，得双链连接产物；
(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链；
(6)文库质检。
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