[发明专利]一种伪狂犬病毒JS-2012株感染性克隆质粒、构建方法与应用

权利要求书

1.一种伪狂犬病毒感染性克隆pBAC-JS2012，其特征在于，该质粒由载体pBeloBAC11、伪狂犬病毒JS-2012株基因组序列、标记基因EGFP和loxp序列组成，其中：

(1)标记基因EGFP位于载体pBeloBAC11的BamHI-HindIII两酶切位点间；

(2)伪狂犬病毒JS-2012株基因组序列插入载体pBeloBAC11的loxp位点，通过JS-2012基因组序列插入时形成两个loxp位点在gG基因终止密码子下游将环状JS-2012基因组分开并实现载体pBeloBAC11与JS-2012基因组序列的连接；

所述的pBAC-JS2012全长序列如SEQ ID NO.24所示。

2.如权利要求1所述的伪狂犬病毒感染性克隆，其特征在于，所述的伪狂犬病毒选自PRV变异株JS-2012株。

3.权利要求1或2所述的伪狂犬病毒感染性克隆在制备检测伪狂犬病毒的试剂或药物中的用途。

4.权利要求1或2所述的伪狂犬病毒感染性克隆在制备预防或治疗伪狂犬病毒病生物制品中的用途。

5.一种区分权利要求1所述的伪狂犬病毒感染性克隆pBAC-JS2012与自然感染毒株的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：使用LgEgIF/RgEgIR为引物进行PCR鉴定，权利要求1所述的伪狂犬病毒感染性克隆pBAC-JS2012扩增出1000bp的条带，为阳性菌落，而gE/gI非缺失的自然感染毒株扩出2000多bp条带；

所述LgEgIF/RgEgIR的序列为：

LgEgIF：ACGGTATCGATAAGCTTGATAGCGTGCACGTCGCCGGCAG

LgEgIR：TCGTGACGCCGTCCACGTAG GTCGTGCCACGATCCGACGACGGG。