[发明专利]用于鉴定黑麂的特异性PCR引物和方法及其在鉴定黑麂中的应用在审
申请号: | 201710119277.X | 申请日: | 2017-03-02 |
公开(公告)号: | CN106834489A | 公开(公告)日: | 2017-06-13 |
发明(设计)人: | 晏鹏;王美菊;李延颖;吴孝兵 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司11283 | 代理人: | 邹飞艳,张苗 |
地址: | 241002 安徽省芜*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 特异性 pcr 引物 方法 及其 中的 应用 | ||
1.一种用于鉴定黑麂(Muntiacus crinifrons)的特异性PCR引物,其特征在于,所述特异性PCR引物包括如SEQ ID No:1所示的引物1,以及如SEQ ID No:2所示的引物2。
2.一种利用特异性PCR引物鉴定黑麂(Muntiacus crinifrons)的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提取待测样品的总DNA;
(2)采用特异性PCR引物对所述总DNA进行PCR扩增;
(3)取步骤(2)中得到的产物做琼脂糖凝胶电泳检测;
其中,所述特异性PCR引物为权利要求1中所述的特异性PCR引物;
其中,在步骤(3)所得的琼脂糖凝胶电泳图中,若含有步骤(2)得到的产物的泳道中出现1条条带,则判断所述待测样品为来自黑麂的样品,若含有步骤(2)得到的产物的泳道中不出现1条条带,则判断所述待测样品不是来自黑麂的样品。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,出现的1条条带中所含有的DNA片段的长度为370bp。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,以30μL的PCR扩增体系为基准,所述引物的浓度为0.25-0.5pmol/L,DNA模板的用量为45-55ng。
5.根据权利要求2或4中所述的方法,其中,所述PCR扩增过程的退火温度为55-65℃,退火时间为25-40s。
6.根据权利要求1所述的特异性PCR引物或权利要求2-5中任意一项所述的方法在鉴定黑麂(Muntiacus crinifrons)中的应用。
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