[发明专利]耐除草剂大豆SHZD32‑1及其衍生品种的实时荧光定性PCR检测方法

权利要求书

1.用于检测耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种的实时荧光定性PCR检测引物对和探针，其特征在于：

所述引物对为由核苷酸序列为SEQ ID No.1所示的正向引物和SEQ ID No.2所示的反向引物组成的引物对1；所述探针为核苷酸序列为SEQ ID No.3所示的探针1；或者，

所述引物对为由核苷酸序列为SEQ ID No.4所示的正向引物和SEQ ID No.5所示的反向引物组成的引物对2；所述探针为核苷酸序列为SEQ ID No.6所示的探针2。

2.权利要求1所述的实时荧光定性PCR检测引物对和探针在检测耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种中的应用。

3.一种耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种的实时荧光定性PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待检测大豆样品的DNA；(2)以提取的DNA为模板，以权利要求1所述的实时荧光定性PCR检测引物对和探针建立PCR扩增体系并进行实时荧光PCR扩增；(3)如果发生特异性扩增，则待检测的大豆样品是耐除草剂大豆SHZD32-1或其衍生品种；如果未发生特异性扩增，则待检测的大豆样品不是耐除草剂大豆SHZD32-1或其衍生品种。

4.一种耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种的实时荧光定性PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待检测大豆样品的DNA；(2)以提取的DNA为模板，以权利要求1所述的引物对1和探针1建立PCR扩增体系并进行实时荧光PCR扩增；(3)如果发生特异性扩增，则待检测的大豆样品是耐除草剂大豆SHZD32-1或其衍生品种；如果未发生特异性扩增，则待检测的大豆样品不是耐除草剂大豆SHZD32-1或其衍生品种。

5.按照权利要求3或4所述的实时荧光定性PCR检测方法，其特征在于，所述PCR扩增体系包括：反应体系总体积为25.0μL，其中，10×PCR缓冲液2.5μL，25mmol/L氯化镁溶液2.5μL，dNTPs混合溶液2.0μL，10μmol/L正向引物1.0μL，10μmol/L反向引物1.0μL，10μmol/L探针0.5μL，终浓度为0.025U/μL的Taq DNA聚合酶，25mg/L DNA模板2.0μL，余量为双蒸水。

6.按照权利要求3或4所述的实时荧光定性PCR检测方法，其特征在于，所述实时荧光PCR扩增的程序包括：95℃变性5min；95℃变性15s，60℃退火延伸60s，循环数40。

7.一种耐除草剂大豆SHZD32-1及其衍生品种的实时荧光定性PCR检测试剂盒，包括：10×PCR缓冲液，氯化镁溶液，dNTPs混合溶液，检测引物对，探针，Taq DNA聚合酶和双蒸水；其特征在于：所述检测引物对、探针为权利要求1所述的实时荧光定性PCR检测引物对和探针。

8.按照权利要求7所述的实时荧光定性PCR检测试剂盒，其特征在于：所述检测引物对为权利要求1所述的引物对1，所述探针为权利要求1所述的探针1。