[发明专利]一种尖叶盆距兰的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种尖叶盆距兰的组培快繁方法；属于植物组织培养领域；旨在通过诱导、增殖、分化、炼苗移栽等步骤成功获得了健壮的尖叶盆距兰试管苗，建立尖叶盆距兰组培快速繁殖技术体系；该组培快繁方法依次进行的类原球茎的诱导步骤、增殖步骤和分化培养步骤；所述的类原球茎的诱导步骤为将外植体的芽点接种到诱导培养基中进行培养，诱导形成类原球茎；其中，所述的诱导培养基包括：1/2MS、0.1～1.0mg/L玉米素、0.1～0.5mg/L吲哚丁酸、15～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、50～100ml/L椰子汁，所述的诱导培养基的pH为5.4～5.8；本发明用于尖叶盆距兰的组织培养。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，尤其涉及一种尖叶盆距兰的组培快繁方法。

背景技术

尖叶盆距兰(Gastrochilus acutifolius(Lindley)Kuntze.)为兰科盆距兰属的一种气生兰，主要分布于尼泊尔、锡金、不丹、印度东北部、缅甸、老挝、越南、泰国等国，我国仅云南南部有分布，主要生长于海拔800～1400米的山地林缘树干上。

尖叶盆距兰伞形花序，萼片和花瓣黄色带紫褐色斑点，边缘具不整齐的流苏，带有香气，具有较高的园艺价值。此外，在云南思茅地地区，尖叶盆距兰被用于淋巴结核、月经不调、跌打损伤、肾炎水肿、呃逆、胃痛等疾病的治疗。尖叶盆距兰为距盆兰属稀少种，其分布狭窄，由于过度的采摘以及生境地的破坏，使其处于濒危状态，因此对其人工繁殖并进行野外回归刻不容缓！

目前，国内外尚未有尖叶盆距兰组织培养技术研究的报道，也未有尖叶盆距兰组织培养技术专利的申请。

发明内容

针对上述技术的不足，本发明提供了一种尖叶盆距兰的组培快繁方法，目的在于通过诱导、增殖、分化、炼苗移栽等步骤成功获得了健壮的尖叶盆距兰试管苗，建立尖叶盆距兰组培快速繁殖技术体系。

为了实现上述技术效果，本发明的技术方案是这样的：一种尖叶盆距兰的组培快繁方法，所述的方法包括依次进行的类原球茎的诱导步骤、增殖步骤和分化培养步骤；所述的类原球茎的诱导步骤为将外植体的芽点接种到诱导培养基中进行培养，诱导形成类原球茎；其中，所述的诱导培养基包括：1/2MS、0.1～1.0mg/L玉米素、0.1～0.5mg/L吲哚丁酸、15～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、50～100ml/L椰子汁，所述的诱导培养基的pH为5.4～5.8。

需要说明的是，所述的增殖步骤为将诱导形成的类原球茎接种到增殖培养基中进行培养；

其中，所述的增殖培养基包括：MS、0.1～1.0mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0.1～0.5mg/L萘乙酸、15～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、0.1～0.3g/L活性炭，所述的增殖培养基的pH为5.4～5.8。

需要说明的是，所述的分化培养步骤为将增殖所得的类原球茎接种到分化培养基中进行培养，分化出试管小苗；

其中，所述的分化培养基包括：1/2MS、1.0～1.5mg/L萘乙酸、15～30g/L蔗糖、3.5～6.0g/L琼脂、0.05～0.1g/L活性炭，所述的分化培养基的pH为5.4～5.8。

需要说明的是，所述的分化步骤之后还包括炼苗和移栽步骤，即将分化所得的试管小苗进行炼苗并移栽至混合基质中，即可得尖叶盆距兰种苗；

其中，所述的混合基质为：体积比为1:1的树皮和兰石。

需要说明的是，所述的诱导培养温度为25～28℃，诱导培养时间为90～120天。

需要说明的是，所述的增殖步骤的培养条件为：培养时间为20～30天，培养温度为25～28℃，光照强度为1500～2000lx，光照时间为12～14小时/天。