[发明专利]一种高纯度奥利万星关键中间体A82846B的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度奥利万星关键中间体A82846B的制备方法，包括以下步骤：

1）将发酵液pH调节至10~11，然后固液分离得到滤液；

2）将滤液pH调节至9.0-9.5后导入大孔吸附树脂进行富集；其中，所述的大孔吸附树脂选自下组：LX18、XAD1600、HP20或HZ816；

3）将步骤2）的树脂净化，然后用解吸液进行解吸并收集组分，得到A82846B解吸混合液；所述的解吸液为0.5%-1.5%（v/v）醋酸水溶液；

4）将A82846B解吸混合液进行浓缩后，进行反相填料层析分离，用极性溶剂与盐水的混合液进行解吸；

5）将层析分离得到的解吸液浓缩；

6）将浓缩液搅拌结晶，过滤并干燥，得到高纯度的奥利万星关键中间体A82846B产品；所述步骤6）先向浓缩液中加入NaCl，然后搅拌，低温结晶；所述NaCl用量为20-30%（m/v），所述的低温为2-8℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）中将发酵液pH调节至10-10.5，步骤2）中将滤液pH调节至9.2~9.5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）中所述的固液分离方法为离心、板框压滤、或减压抽滤。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2）中所述的大孔吸附树脂独立的选自LX18、XAD1600或HP20。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3）中所述的树脂净化是采用pH为7-9的纯化水净化树脂柱。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤4）、5）中所述的浓缩方式为纳滤，浓缩至浓度为20-50mg/ml。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤4）中所述的反相填料为采用聚苯乙烯或聚丙烯酸酯制备的聚合物微球、ODS C18或Fraclite800。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤4）中所述的解吸液，以解吸液总体积计算，盐水为0.5%-1% （w/v）NH₄H₂PO₄；极性溶剂为甲醇或乙腈，其浓度为2-10%（v/v）的。

9.根据权利要求1~8任一项所述方法，其特征在于，在步骤6）之后，采用甲醇、乙醇或异丙醇溶液对所得到的晶体进行结晶。

10.根据权利要求1~8任一项所方法，其特征在于，在步骤6）之前，将步骤4）层析分离得到的解吸液导入大孔吸附树脂进行脱盐处理，用树脂净化，用10-40%（v/v）的甲醇或乙腈水溶液进行解吸，将得到的脱盐解吸液浓缩；其中，所述大孔吸附树脂选自LX18、XAD1600、HP20和HZ816；所述的树脂净化是采用pH为7-9的纯化水净化树脂柱。