[发明专利]液固双相发酵生产厚垣孢普可尼亚菌孢子的方法

权利要求书

1.一种液体发酵培养基，其特征在于，所述液体发酵培养基的配方为：蔗糖10-40 g/L、蛋白胨0.5-2.5 g/L、NaNO₃ 0.5-2.5 g/L、KH₂PO₄ 0.2-1.2 g/L、K₂HPO₄ 0.2-1.2 g/L、MgSO₄•7H₂O 0.25-3 g/L、FeSO₄•7H₂O 0.01-0.05 g/L、初始pH 5-8。

2.根据权利要求1所述的一种液体发酵培养基，其特征在于，所述液体发酵培养基的配方为：蔗糖15-30 g/L、蛋白胨1-2 g/L、NaNO₃ 1-2 g/L、KH₂PO₄ 0.25-0.8 g/L、K₂HPO₄ 0.25-0.8 g/L、MgSO₄•7H₂O 0.5-2.5 g/L、FeSO₄•7H₂O 0.01-0.02 g/L、初始pH 5.5-7。

3.根据权利要求1所述的一种液体发酵培养基，其特征在于，所述液体发酵培养基的配方为：蔗糖25 g/L、蛋白胨 1.5 g/L、NaNO₃ 1.5 g/L、KH₂PO₄ 0.5 g/L、K₂HPO₄ 0.5 g/L、MgSO₄•7H₂O 1 g/L、FeSO₄•7H₂O 0.01 g/L、初始pH 6。

4.一种液固双相发酵生产厚垣孢普可尼亚菌孢子的方法，其特征在于，包括如下步骤：

a菌种活化：活化厚垣孢普可尼亚菌菌种，得到活化后的孢子悬液；

b摇瓶种子液制备：将活化后的孢子悬液按体积比8-10%的接种量接种于已灭菌的摇瓶液体发酵培养基中，进行摇瓶培养，得到摇瓶种子液；

c液体发酵：将摇瓶种子液按照体积比8-15%的接种量接种于已灭菌的发酵罐液体发酵培养基中，进行发酵培养，得到液体发酵产物；

d固体发酵产孢：将液体发酵产物按照质量比20-25%的接种量接种于已灭菌的固体发酵培养基中，进行浅盘固体发酵，得到厚垣孢普可尼亚菌孢子；

其中，所述步骤b中摇瓶液体发酵培养基和所述步骤c中发酵罐液体发酵培养基为权利要求1-3中任一项所述培养基。

5.根据权利要求4所述的一种液固双相发酵生产厚垣孢普可尼亚菌孢子的方法，其特征在于，所述步骤d中固体发酵培养基包括如下重量份的组分：麸皮10-15份、玉米秸秆2-5份、玉米粉4-8份、营养液8-14份；其中，所述营养液中各组分的质量百分数为：蔗糖2-4%、蛋白胨0.5-2.5%、NaCl 2-4 %、NaNO₃ 0.5-1%、KH₂PO₄0.5-1%、K₂HPO₄0.5-1%、MgSO₄•7H₂O 0.5-1%、FeSO₄•7H₂O 0.2-0.4%，余量为水。

6.根据权利要求4所述的一种液固双相发酵生产厚垣孢普可尼亚菌孢子的方法，其特征在于，所述步骤d中固体发酵培养基包括如下重量份的组分：麸皮12-15份、玉米秸秆2-3份、玉米粉5-6份、营养液9-12份；其中所述营养液中各组分的质量百分数为：蔗糖2.5-3.5%、蛋白胨1-2%、NaCl 2.5-3.5%、NaNO₃ 0.5-0.8%、KH₂PO₄0.5-0.8%、K₂HPO₄0.5-0.8%、MgSO₄•7H₂O 0.5-1%、FeSO₄•7H₂O 0.25-0.35%，余量为水。