[发明专利]ATP核酸适配体、利用纳米金显色检测ATP的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201710124724.0 | 申请日： | 2017-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN106967721B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 张晶珠;樊婷婷;毛瑜;李露露 | 申请（专利权）人： | 深圳市坤健创新药物研究院 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115;G01N21/33 |
| 代理公司： | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人： | 张清芳 |
| 地址： | 518063 广东省深圳市龙华新区观澜大*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | atp 核酸 适配体 利用 纳米 显色 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种利用纳米金显色检测ATP的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）使含有ATP的待测溶液与含有ATP核酸适配体的检测溶液混合；所述ATP核酸适配体的碱基序列如SEQ ID NO：1所示：5’-ACCTTCCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT-3’（SEQ ID NO：1）；
（2）将步骤（1）得到的混合液与纳米金溶液混合，然后加入盐溶液并混匀；
（3）仪器检测或观测步骤（2）得到的混合溶液；
步骤（1）中，含有ATP的待测溶液中的ATP与含有ATP核酸适配体的检测溶液中的ATP核酸适配体的摩尔比为1：1-1000；
步骤（1）中，含有ATP核酸适配体的检测溶液中ATP核酸适配体的浓度为0.1μM-10μM；
步骤（1）中，含有ATP核酸适配体的检测溶液为Tris-HCl缓冲液；
步骤（2）中，步骤（1）得到的混合液中的ATP核酸适配体与纳米金溶液中的纳米金颗粒的摩尔比为1：0.001-0.01；
步骤（2）中，所述盐溶液的加入量使得步骤（2）得到的混合溶液中盐的终浓度为10-100mM。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤（2）中，所述盐溶液为无机盐溶液。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，步骤（2）中，所述盐溶液为氯化钠溶液。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述纳米金溶液中纳米金颗粒的粒径为10-20nm。
5.一种利用纳米金显色检测ATP的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下组成：
1）含有如权利要求1所述的ATP核酸适配体的检测溶液；
2）盐溶液；
3）纳米金溶液；
含有ATP核酸适配体的检测溶液中ATP核酸适配体的浓度为0.1μM-10μM；
含有ATP核酸适配体的检测溶液为Tris-HCl缓冲液；
所述盐溶液的浓度为1-2M。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述盐溶液为氯化无机盐溶液。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述盐溶液为氯化钠溶液。
8.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述纳米金溶液中纳米金颗粒的粒径为10-20nm。
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