[发明专利]一种乳房修补片及其制备和应用方法

权利要求书

1.一种乳房修补片，其特征在于：该乳房修补片包括凹凸纹路固定层和多孔层的可降解吸收的双层结构，且该双层结构均为采用动物的小肠粘膜下层组织材料为原料、经过去除免疫原性、保留完整的细胞外基质成分的材料；

修补片具体的制备步骤包括：组织前置处理、病毒灭活、免疫原去除、干燥、冷冻干燥和成型；

其中：

（1）组织前置处理：取小肠粘膜下层组织材料，清洗并将水滤干；

（2）病毒灭活：采用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡小肠粘膜下层组织材料；完成后在超声波清洗机中清洗；其中过氧乙酸的体积百分比浓度为0.1%-5%、乙醇的体积百分比浓度为5%-40%，过氧乙酸-乙醇溶液与小肠粘膜下层组织材料的体积比为(3-20)︰1，灭活时间2-4小时，灭活的温度范围为10-40℃；清洗过程包括：采用pH6-8中的PBS溶液超声处理，溶液与小肠粘膜下层组织材料体积比为20：1至40：1之间，每次10-30分钟；清洗2-4次，检测pH为6-8之间；采用纯化水清洗，溶液与小肠粘膜下层组织材料比例为20：1至40：1之间，检测电导率为10μS/cm以下终止；

（3）免疫原去除：采用含有胰蛋白酶和EDTA的PBS溶液，使用包含至少两个频率的超声进行超声振荡处理；完成后在超声波清洗机中处理，得到免疫原去除后的小肠粘膜下层基质材料；所述免疫原去除液中胰蛋白酶质量百分比浓度为0.01-0.2%，EDTA的浓度为0.1-1mmol/L；免疫原去除液pH值为7.0-8.0；所述免疫原去除液与小肠粘膜下层组织材料体积比为(20-40)︰1；超声包括的两个频率，其中低频率范围为15-30KHz，高频范围为60-90KHz，其中低频处理5-30min，高频处理5-30min，温度范围为20-35℃；清洗过程包括：采用pH6-8中的PBS溶液超声处理，溶液与小肠粘膜下层组织材料体积比为20-40：1之间，每次10-30分钟；清洗2-4次，检测pH为6-8之间；采用降温的注射用水清洗，注射用水与小肠粘膜下层组织材料比例为20-40：1之间，检测清洗前后注射用水电导率差为1μS/cm以下终止；

（4）干燥：将步骤（3）的免疫原去除的小肠粘膜下层基质材料固定于带有凹凸纹路的模具上，并将模具和小肠粘膜下层基质材料在热循环烘箱中进行干燥；干燥温度25-40℃、时间为8-16小时，通过模具成型在固定层上形成凹凸纹路制备出凹凸纹路固定层；

（5）冷冻干燥：将步骤（3）的免疫原去除的小肠粘膜下层基质材料平铺于真空冷冻干燥机中进行冷冻干燥；

（6）成型：将步骤（4）所得的干燥小肠粘膜下层基质材料与步骤（5）所得冻干的小肠粘膜下层基质材料采用胶原蛋白胶粘接成型。

2.根据权利要求1所述的乳房修补片，其特征在于：所述动物为哺乳动物。

3.根据权利要求2所述的乳房修补片，其特征在于：所述哺乳动物为猪或牛。

4.根据权利要求1所述的乳房修补片，其特征在于：所述去除免疫原性是指细胞残留量小于10个，DNA残留量小于10ng/mg，半乳糖苷酶清除率为99 %以上；所述保留完整的细胞外基质成分指保留包含胶原蛋白、多糖物质、活性因子及生长因子成分；所述胶原蛋白为I型胶原蛋白及III型、IV型和VI型胶原蛋白的组合物，所述多糖物质为包含硫酸软骨素和透明质酸的组合物，所述活性因子包含纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、整合素及其配体的组合物，所述生长因子成分为碱性生长因子和血管内皮生长因子。

5.根据权利要求1所述的乳房修补片，其特征在于：所述的乳房修补片在体内降解时间1-3个月内；所述的乳房修补片的拉伸断裂强度大于50N/cm，缝合保持力大于10N；所述的乳房修补片为微观多孔结构，整个修补片的孔隙率在60%以上。