[发明专利]一种检测TTLL12基因新转录本的引物和方法在审
申请号: | 201710128054.X | 申请日: | 2017-03-06 |
公开(公告)号: | CN106868144A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 肖莹莹;文锐玲;陈白雪 | 申请(专利权)人: | 广州金域医学检验中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京精金石专利代理事务所(普通合伙)11470 | 代理人: | 刘晔 |
地址: | 510005 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 ttll12 基因 转录 引物 方法 | ||
1.一种检测TTLL12基因新转录本的引物,其特征在于,包括针对TTLL12基因的两对特异性PCR引物:所述针对TTLL12基因第一对特异性PCR引物的正向引物为:5'-GAAGATGCCGGTGTGGTATA-3',反向引物为:5'-CACGTCCGTGTAGACCTTGA-3';所述针对TTLL12基因第二对特异性PCR引物的正向引物为:5'-GAGACTTTGCCTACGGAGAGA-3',反向引物为:5'-GCTGAGTTTCCTGTAGTCCTTGA-3'。
2.如权利要求1所述的检测TTLL12基因新转录本的引物,其特征在于,所述TTLL12基因两对特异性PCR引物的浓度比为1:1。
3.如权利要求1所述的检测TTLL12基因新转录本的引物,其特征在于,所述TTLL12基因两对特异性PCR引物的正向引物与反向引物的浓度比为1:1。
4.如权利要求1所述的检测TTLL12基因新转录本的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1收集培养中的A549、PC-9、SPCA-1和SK-MES-1细胞株,提取RNA,逆转录成cDNA模板;
S2以步骤S1的cDNA为模板,采用权利要求1所述的TTLL12基因两对特异性PCR引物进行PCR扩增;
S3将所得的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。
5.如权利要求4所述的检测TTLL12基因新转录本的方法,其特征在于,所述步骤S2的PCR扩增条件包括:阶段1:94℃2min;阶段2:94℃,15s;58℃,15s;72℃,30s,30个循环;阶段3:72℃,5min;阶段4:12℃,保温。
6.如权利要求1所述的检测TTLL12基因新转录本的引物在制备检测TTLL12基因新转录本试剂盒中的用途。
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