[发明专利]一种提高大肠杆菌积累丙酮酸的方法

权利要求书

1.一种强化丙酮酸积累的方法，其特征在于，通过定向基因编辑删减大肠杆菌宿主细胞中乳酸脱氢酶的编码基因，丙酮酸氧化酶的编码基因，磷酸转乙酰酶的编码基因和乙酸激酶编码基因得到积累丙酮酸的大肠杆菌基因工程菌株，命名为大肠杆菌KLPP；以大肠杆菌KLPP为出发菌株，利用Tn5转座子对nanC基因、yagU基因、ydfJ基因或intR基因的插入失活，获得的菌株与大肠杆菌KLPP相比，丙酮酸积累提高。

2.权利要求1所述的方法在发酵生产丙酮酸中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

发酵温度为30-38°C；

发酵体系的pH值为6.0-7.5；

发酵时间为16-72小时；

发酵接种量的体积百分比为0.1％-20％；

发酵培养基中的碳源是葡萄糖、淀粉、木糖、生物质中的一种或几种；

发酵培养基中的氮源是酵母膏、蛋白胨、玉米浆、糖蜜、氨水、铵盐和尿素中的一种或几种；

发酵培养基中的无机盐是磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫酸镁、氯化钙、硫酸铵、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸钠、氯化钴和硫酸铜中的一种或几种。