[发明专利]提升克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法及改造菌有效

专利信息
申请号: 201710135290.4 申请日: 2017-03-08
公开(公告)号: CN108570437B 公开(公告)日: 2021-03-16
发明(设计)人: 郝健;顾金杰;史吉平;姜标 申请(专利权)人: 中国科学院上海高等研究院
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12P7/04;C12R1/22
代理公司: 上海硕力知识产权代理事务所(普通合伙) 31251 代理人: 刘红梅
地址: 201210 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 提升 克雷伯氏 肺炎 杆菌 生产 丁醇 方法 改造
【权利要求书】:

1.提升克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)生产异丁醇的方法,该方法为:失活催化乙酰乳酸脱羧反应的乙酰乳酸脱羧酶并且高水平表达催化吲哚-3-丙酮酸脱羧反应的吲哚-3-丙酮酸脱羧酶;或者同时失活催化乙酰乳酸脱羧反应的乙酰乳酸脱羧酶和催化丙酮酸合成乳酸反应的乳酸脱氢酶,高水平表达催化吲哚-3-丙酮酸脱羧反应的吲哚-3-丙酮酸脱羧酶。

2.改造的克雷伯氏肺炎杆菌,其特征在于:所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌为催化乙酰乳酸脱羧反应的乙酰乳酸脱羧酶失活、并且催化吲哚-3-丙酮酸脱羧反应的吲哚-3-丙酮酸脱羧酶高水平表达的克雷伯氏肺炎杆菌;或者催化乙酰乳酸脱羧反应的乙酰乳酸脱羧酶和催化丙酮酸合成乳酸反应的乳酸脱氢酶同时失活、并且催化吲哚-3-丙酮酸脱羧反应的吲哚-3-丙酮酸脱羧酶高水平表达的克雷伯氏肺炎杆菌。

3.权利要求2所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法,该方法为:将所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌接种到碳源培养基中进行发酵培养,发酵过程中菌体将培养基中的碳源转化成异丁醇。

4.如权利要求3所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法,其特征在于:所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌发酵培养的条件为:发酵温度为25-45℃,发酵过程中供氧,保持发酵过程中发酵液的pH值在5.5-8.5之间,培养菌体。

5.如权利要求3所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法,其特征在于:所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌发酵培养的条件为:发酵温度为30-40℃,发酵过程中微量供氧,保持发酵过程中发酵液的pH值在6.5-7.5之间。

6.如权利要求3所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法,其特征在于:发酵过程中待碳源消耗至1-20g/L时流加碳源进行补料发酵。

7.如权利要求3所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产异丁醇的方法,其特征在于,所述发酵培养基的组成包括:碳源10-200g/L,氮源1-50g/L,无机盐0-10g/L;所述碳源选自葡萄糖、甘油、木糖、生物质水解液中的一种或多种;所述氮源选自玉米浆、酵母提取物、蛋白胨、豆饼粉、尿素、氨、铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐;所述无机盐选自钾盐、镁盐、钙盐、磷酸盐。

8.权利要求2所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌在生产异丁醇中的应用。

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