[发明专利]一种超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

光动力疗法(PDT)是用光敏药物和激光活化治疗肿瘤疾病的一种新方法，利用特定波长照射肿瘤部位，能使选择性聚集在肿瘤组织的光敏药物活化，引发光化学反应破坏肿瘤。血卟啉为光敏性物质，在光刺激下可发生能态跃迁并发出特征荧光，同时将部分能量传递给周围氧，生成活性很强的单态氧。单态氧能与附近的生物大分子发生氧化反应，产生细胞毒性进而杀伤肿瘤细胞。由于血卟啉对光、氧化剂及一些射线非常敏感，血卟啉注射液的贮存及使用条件苛刻，给制药厂生产和医院及病人临床使用都带来很大的不便。另外光在生物组织穿透力弱，且会对人体皮肤产生一定的伤害，只能用于治疗一些浅表性肿瘤，限制了血卟啉在临床上的使用范围。

1989年，Umenura首次报道了用超声激活血卟啉进行杀伤肿瘤细胞和抑制其生长的初步尝试，并将此方法称为声动力学疗法。此治疗方法克服光动力疗法的不足，拓展了血卟啉在临床应用的范围。当前，国内外有许多学者就超声激活血卟啉的声参量的选取、肿瘤系的选择、抗肿瘤的效果、作用机理等进行了大量的研究，并取得了一定的成效。王攀等人研究了血卟啉衍生物在肿瘤组织中的富集情况，当给予血卟啉衍生物注射液小鼠尾静脉给药6h后，血卟啉在肿瘤组织分布达到最大值，但此时大部分的血卟啉存在于血液、皮肤、肝脏和肾脏部位，只有不到20％存在于肿瘤部位，药物靶向性低(王攀，王筱冰，刘全宏，血卟啉在H-22肝癌荷瘤小鼠体内的分布，中国实验动物学报，2007,15(6)：401-405)。

环糊精，又名环聚葡萄糖，是通过环糊精葡萄糖基转移酶(CGT)作用于淀粉产生，由多个葡萄糖单元组成的环状低聚糖。环糊精独特的结构可作为包合材料与有机物发生包合反应形成包合物，有机物的物理性质、化学性质及生物活性等也会较包合前发生很大变化，制药行业常采用药物与环糊精包合，包合后可增加药物在水中的溶解度、稳定性、还能掩盖不良气味、延长药物的释放时间、提高药物的生物利用度等。环糊精包合物的优势在于它是从分子水平上改变药物性质的，对药物的药动学几乎没有任何影响，因此环糊精作为理想的药物载体被广泛应用于医药制剂领域。

近年来研究结果表明，叶酸受体在某些实体瘤上有高表达，如卵巢癌、子宫内膜癌、直肠癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、神经内分泌癌和脑转移癌等，而在正常组织低表达，这种性质为利用叶酸受体作为药物靶点提供了契机。

发明内容

针对血卟啉水溶性小、肿瘤靶向性低、光毒性强及临床使用条件苛刻的问题，本发明提供了一种超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂，所述注射剂可有效地运载药物到达肿瘤部位，结合体外超声条件，提高血卟啉治疗效果，同时减小其光毒作用。

进一步地，本发明还提供上述超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂的制备方法，先将叶酸与氨基环糊精反应生成叶酸偶联环糊精，再将叶酸偶联环糊精和血卟啉反应，得到叶酸偶联环糊精血卟啉包合物，最后将叶酸偶联环糊精血卟啉包合物和三氯叔丁醇加入到注射用水中，灭菌即得超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂，具体步骤如下：

步骤1，将叶酸溶于N,N二甲基甲酰胺中，加入N-羟基琥珀酰亚胺和N,N’二环己基碳二亚胺，在5℃-50℃下搅拌反应，再加入氨基环糊精继续反应，其中叶酸、N-羟基琥珀酰亚胺、N,N’二环己基碳二亚胺、氨基环糊精的摩尔比为(1-10):1:1:10；

步骤2，将步骤1得到的反应液旋转蒸干，得干燥物，干燥物用水溶解后过滤得澄清滤液，澄清滤液旋转蒸干后，将干燥物溶于丙酮中，过滤后将滤饼再溶于丙酮中，过滤，得滤饼，将其干燥，得叶酸偶联环糊精；

步骤3，将叶酸偶联环糊精和血卟啉混合后用水溶解，在5℃-50℃条件下避光搅拌反应，其中叶酸偶联环糊精和血卟啉的摩尔比为(5-10):1；

步骤4，将步骤3得到的反应液旋转蒸干，得干燥物，干燥物用乙醇溶解后过滤得滤饼，将滤饼再用乙醇溶解后过滤，去除滤液，得滤饼，滤饼干燥得到叶酸偶联环糊精血卟啉包合物；

步骤5，将叶酸偶联环糊精血卟啉包合物和三氯叔丁醇加入到注射用水中，搅拌溶解，过滤，调节pH至6-7，灭菌即得超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂，其中，以包合的血卟啉计算，叶酸偶联环糊精血卟啉包合物和三氯叔丁醇的摩尔比为5:(4-8)。

优选地，步骤1中，所述的搅拌反应时间为0.5h-5h，加入氨基环糊精后继续反应时间为12h-48h。

优选地，步骤3，所述的搅拌反应时间为12h-96h。