[发明专利]快速观察拟南芥胚珠形态及统计外珠被细胞数目的方法有效
申请号: | 201710139085.5 | 申请日: | 2017-03-09 |
公开(公告)号: | CN106950088B | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 秦源;蔡汉阳;张曼;赵丽华;王路路 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/38;G01N21/33 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 观察 拟南芥 胚珠 形态 统计 珠被 细胞 目的 方法 | ||
1.一种快速观察拟南芥胚珠形态及统计外珠被细胞数目的方法,其特征在于,其具体步骤如下:
(1)溶液的配制:配制1‰w/v荧光增白剂溶液和浓度为2M的氢氧化钾的溶液;
(2)材料的获得:取刚要露白的拟南芥花苞放置在贴有双面胶的载玻片上,用注射器的针头挑取拟南芥的胚珠;
(3)玻片制备:吸取1‰w/v荧光增白剂10µL置于载玻片上,将步骤(2)所得胚珠连同胎座置于荧光增白剂液滴上,再加入2M的氢氧化钾溶液10µL,用移液枪轻轻混匀,盖上盖玻片;
(4)孵育:将步骤(3)制备好的玻片在室温中放置10-15分钟,让荧光增白剂充分渗透进入拟南芥的胚珠中;
(5)Confocal显微镜拍照:将步骤(4)所得孵育好的玻片放置在Confocal显微镜下,用波长范围在100~400nm之间的紫外线观察,并拍照;
(6)外珠被细胞数目统计:统计步骤(5)所得照片中的外珠被细胞数目。
2.根据权利要求1所述的一种快速观察拟南芥胚珠形态及统计外珠被细胞数目的方法,其特征在于,步骤(1)所述荧光增白剂为CALCOFLOUR WHITE。
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