[发明专利]一种检测卡那霉素的生物传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种检测卡那霉素的生物传感器，其特征在于，由以下步骤制备而成：

（1）对电极进行预处理；

（2）将HAP2修饰到电极表面；

（3）将均相反应产物层修饰到电极表面；

所述的步骤（3）将均相反应产物层修饰到电极表面的操作步骤如下：

（1）将3μL灭菌水，5μL 10×的buffer缓冲液、4μL 50 μM的HAP1， 2μL 10 μM Primer，1μL lambda核酸外切酶，2μL 100 μM Helper，和2μL待测目标物加入离心管中，震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2h；

（2）将孵育好的混合溶液放在75℃的恒温箱中孵育5 min，使lambda核酸外切酶失活；

（3）将1μL Nb.BbvCI与（2）中的溶液混合，取10μL滴加到修饰好HAP2的电极上，将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h；

（4）用磁力搅拌器在PBS溶液中清洗电极，每次10min，共清洗3次；

（5）将20μM hemin滴加在清洗过的电极上，将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育40min，用磁力搅拌器在PBS溶液中清洗电极，每次10min，共清洗3次；

所述Helper的序列如SEQ ID NO:1所示；

所述primer的序列如SEQ ID NO:2所示；

所述HAP1的序列如SEQ ID NO:3所示；

所述HAP2的序列如SEQ ID NO:4所示。

2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，步骤（2）HAP2修饰到电极表面的操作步骤如下：将10μL 10μM的HAP2溶液滴加到经过预处理的电极表面，在37℃下孵育2h。

3. 根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，对电极进行预处理操作为，电极在0.3和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光处理，直到呈镜面，用PBS和二次水冲洗。

4.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述电极为金电极。