[发明专利]双向信号扩增检测miRNA的试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201710149371.X | 申请日： | 2017-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN106967794B | 公开（公告）日： | 2020-04-14 |
| 发明（设计）人： | 蒋宇扬;毛瑜;樊婷婷;李露露 | 申请（专利权）人： | 清华大学深圳研究生院 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 北京思创毕升专利事务所 11218 | 代理人： | 孙向民;廉莉莉 |
| 地址： | 518055 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 双向 信号 扩增 检测 mirna 试剂盒 方法 | ||
1.一种双向信号扩增检测miRNA的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：
(1)第一发卡结构DNA探针，所述第一发卡结构DNA探针能够与所述miRNA碱基配对，从而打开发卡结构；
(2)第二发卡结构DNA探针，所述第二发卡结构DNA能够与miRNA竞争结合所述第一发卡结构DNA探针，从而释放miRNA，并且，所述第二发卡结构DNA探针与所述第一发卡结构DNA探针形成的DNA复合体具有至少一个粘性末端；
(3)环状DNA探针，所述环状DNA探针中的一段连续碱基与DNA复合体的一个粘性末端互补，并且，所述环状DNA探针与所述DNA复合体能够通过滚环扩增得到含有多G重复序列的G四联体扩增产物；
(4)ThT荧光染料；
其中，所述miRNA为miR-21；所述第一发卡结构DNA探针具有如SEQ ID NO：1所示的碱基序列；所述第二发卡结构DNA探针具有如SEQ ID NO：2所示的碱基序列；所述环状DNA探针具有如SEQ ID NO：3所示的碱基序列。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述第一发卡结构DNA探针和所述第二发卡结构DNA探针共同以检测溶液1的形式提供。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述检测溶液1中，所述第一发卡结构DNA探针和所述第二发卡结构DNA探针的浓度均为0.1μM-10μM。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括滚环扩增所需试剂。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，所述环状DNA探针与所述滚环扩增所需试剂共同以检测溶液2的形式提供。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其中，所述检测溶液2中，所述环状DNA探针的浓度为10nM-1000nM。
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