[发明专利]一种荧光标记的糖分子及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种荧光标记的糖分子，其特征在于：所述荧光标记的糖分子的制备方法包括以下步骤：

（1）还原胺化：将糖分子溶解在含有二氨基试剂的乙酸溶液中，再加入还原剂，形成反应体系，搅拌反应5h～24h，反应结束后用1kDa～10kDa透析袋透析，透析液减压浓缩后冷冻干燥，得到糖分子还原胺化产物；所述二氨基试剂为1,5-戊二胺、1,6-己二胺、1,7-庚二胺、1,8-辛二胺、1,9-辛二胺和1,10-壬二胺中的至少一种，所述二氨基试剂在反应体系中的摩尔浓度为糖分子在反应体系中摩尔浓度的10～200倍；

（2）荧光标记：将步骤（1）糖分子还原胺化产物用磷酸盐缓冲液溶解后加入荧光分子标记试剂形成总反应溶液，避光反应，对糖分子进行荧光标记，获得所述荧光标记的糖分子，所述荧光标记试剂在总反应溶液的最终摩尔浓度为糖分子在总反应溶液摩尔浓度的2～10倍；

（3）纯化：取步骤（2）荧光标记的糖分子用凝胶色谱柱纯化，以蒸馏水为流动相，收集示差检测器和荧光检测器重合的检测信号峰，减压浓缩干燥，得纯化后的荧光标记的糖分子；

所述糖分子为低聚褐藻淀粉；所述荧光分子为N-羟基琥珀酰亚胺酯活化的花青染料Cy3、Cy5和Cy7中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的荧光标记的糖分子，其特征在于：所述步骤（1）中加入的还原剂为硼氢化钠、硼氢化锂、三甲胺硼烷、三乙胺硼烷、吗啉硼烷和4-甲基吗啉硼烷中的至少一种，所述还原剂在反应体系中的摩尔浓度为糖分子在反应体系中摩尔浓度的10～200倍。

3.权利要求1所述的荧光标记的糖分子在制备用于检测糖分子在体内代谢的检测剂中的应用，其特征在于，所述荧光标记的糖分子的检测时间为0.5~8h。