[发明专利]新型重组双功能融合蛋白及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种重组双功能融合蛋白，其特征在于，所述重组双功能融合蛋白包含：

第一结合结构域(D1)；和

第二结合结构域(D2)；

其中，所述第一结合结构域为抗CD20单克隆抗体，并且所述抗CD20单克隆抗体包括SEQID NO.5所示的重链可变区和SEQ ID NO.7所示的轻链可变区；

所述第二结合结构域为人SIRPα膜外端第一个功能区(SIRPα-Domain 1,SD1)，并且所述第二结合结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；

并且，D1和所述D2通过连接肽相连，所述连接肽包括抗体恒定区序列；

并且，D2连接在D1的重链恒定区末端；

并且，所述重组双功能融合蛋白为同源二聚体。

2.如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗CD20单克隆抗体的重链和第二结合蛋白连接形成的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗CD20单克隆抗体的轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗CD20单克隆抗体的重链和第二结合蛋白连接形成的多肽的编码序列如SEQ ID NO.1所示，并且所述抗CD20单克隆抗体的轻链的编码序列如SEQ ID NO.2所示。

5.如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗CD20单克隆抗体包括通过二硫键连接的四条多肽链(两条重链及两条轻链)，并且D2连接在所述抗CD20单克隆抗体的重链C端。

6.一种多核苷酸，其特征在于，它编码如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白。

7.一种载体，其特征在于，它含有权利要求6所述的多核苷酸。

8.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求7所述的载体或基因组中整合有权利要求6所述的多核苷酸。

9.一种免疫偶联物，其特征在于，该免疫偶联物含有：

(a)如如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白；和

(b)选自下组的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、或酶。

10.一种药物组合物，其特征在于，它含有：

(i)如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白、或如权利要求9所述的免疫偶联物；以及

(ii)药学上可接受的载体。

11.如权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物为注射剂型。

12.如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白、或如权利要求9所述的免疫偶联物的用途，其特征在于，用于制备药物；所述药物用于治疗或预防表达CD20蛋白的肿瘤。

13.如权利要求12所述的用途，其特征在于，所述肿瘤包括：胃癌、淋巴瘤、肝癌、白血病、肾脏肿瘤、肺癌、小肠癌、骨癌、前列腺癌、结直肠癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺癌、或肾上腺肿瘤。

14.一种重组双功能融合蛋白的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)在适合表达的条件下，培养权利要求8所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出如权利要求1所述的重组双功能融合蛋白。