[发明专利]5-氨基戊酸的生物转化方法在审
申请号: | 201710152661.X | 申请日: | 2017-03-15 |
公开(公告)号: | CN108624632A | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | 蔡真;翟晓云;张君丽;裴万礼;李寅 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所;中国科学院大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N9/10;C12N9/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氨基 氨基戊酸 氨基转移酶 丁醛脱氢酶 生物转化 二胺 戊醛 高效生产 高效转化 产率 底物 高产 筛选 转化 联合 | ||
1.一种5-氨基戊酸的生产方法,是以1,5-戊二胺为底物,通过氨基转移酶和γ-氨基丁醛脱氢酶将所述1,5-戊二胺转化为5-氨基戊酸。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
所述氨基转移酶的氨基酸序列为如下1)或2)的蛋白质:
1)由序列表中序列13所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
2)将序列表中序列13所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白质;
所述γ-氨基丁醛脱氢酶的氨基酸序列为如下3)或4)的蛋白质:
3)由序列表中序列14所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
4)将序列表中序列14所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3)衍生的蛋白质。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述方法为将1,5-戊二胺、氨基转移酶、γ-氨基丁醛脱氢酶、磷酸吡哆醛、α-酮戊二酸、NAD+和缓冲液混匀,得到反应体系,反应,得到5-氨基戊酸。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
所述1,5-戊二胺在所述反应体系中的浓度为200mM;
所述氨基转移酶在所述反应体系中的浓度为0.091U/mL;
所述γ-氨基丁醛脱氢酶在所述反应体系中的浓度为0.088U/mL;
所述磷酸吡哆醛在所述反应体系中的浓度为0.08mM;
所述α-酮戊二酸在所述反应体系中的浓度为200mM;
所述NAD+在所述反应体系中的浓度为200mM。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
所述反应的条件为30℃反应8h。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:
所述氨基转移酶由来源于大肠杆菌的ygjG基因编码;
或,所述γ-氨基丁醛脱氢酶由来源于恶臭假单胞菌的adPp基因编码;
或,所述大肠杆菌为大肠杆菌Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655;
或,所述恶臭假单胞菌为恶臭假单胞菌Pseudomonas putida LS46 Contig14;
或,所述氨基转移酶的编码基因序列为序列1;
或,所述γ-氨基丁醛脱氢酶的编码基因序列为序列5。
7.按照权利要求1-6任一所述的方法制备得到的5-氨基戊酸。
8.权利要求1-6中任一所述的氨基转移酶和/或权利要求1-6中任一所述的γ-氨基丁醛脱氢酶在生产5-氨基戊酸中的应用。
9.一种用于生产5-氨基戊酸的产品,其包括权利要求1-6中任一所述的氨基转移酶和/或权利要求1-6中任一所述的γ-氨基丁醛脱氢酶。
10.权利要求9所述的产品在生产5-氨基戊酸中的应用。
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