[发明专利]一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底及其制备和使用方法

权利要求书

1.一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的制备方法，其特征在于：该基底由下至上分别为滤膜层(1)、单分散纳米粒子层(2)和镀金属层(3)，且各层之间以自然堆叠方式进行连接；其中所述的单分散纳米粒子层(2)中纳米粒子的粒径为100～500nm，且比滤膜层(1)的滤孔孔径大；所述的单分散纳米粒子层(2)为单层或多层；所述的单分散纳米粒子层(2)中的纳米粒子为二氧化硅纳米粒子、聚苯乙烯纳米粒子、聚甲基丙烯酸甲酯纳米粒子、二氧化钛纳米粒子、硅纳米粒子或水凝胶纳米粒子；所述的滤膜层(1)的滤孔孔径为100～450nm，其材料是尼龙微孔滤膜、硝酸纤维素滤膜或普通滤纸；所述的镀金属层(3)为镀银层、镀金层或者镀铜层，该方法包括以下步骤：

步骤一、以滤膜层(1)为底层，通过可拆卸滤器将纳米粒子溶液过滤至滤膜层(1)上，纳米粒子在滤膜层(1)上自组装形成有序结构，得到单分散纳米粒子层(2)；

步骤二、将金纳米粒子溶液利用可拆卸滤器过滤至步骤一得到的单分散纳米粒子层(2)上，在单分散纳米粒子层(2)表面上通过物理吸附作用得到金纳米粒子层；

步骤三、以上述金纳米粒子层中金纳米粒子为核，通过电镀沉积法、无电解电镀沉积法或电子束蒸镀沉积法在其上生长金属，制得镀金属层(3)，得到检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底；其中，当镀金属层(3)为镀金层和镀银层时，采用电镀沉积法、无电解电镀沉积法或电子束蒸镀沉积法，当镀金属层(3)为镀铜层时采用电镀沉积法。

2.如权利要求1所述的一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的制备方法，其特征在于：所述的可拆卸滤器的直径为1～10cm，所述的滤膜层(1)的直径为1～10cm，且比可拆卸滤器的直径小；所述金纳米粒子溶液中的金纳米粒子的粒径为1～50nm，所述的纳米粒子溶液为二氧化硅纳米粒子溶液、聚苯乙烯纳米粒子溶液、聚甲基丙烯酸甲酯纳米粒子溶液、二氧化钛纳米粒子溶液、硅纳米粒子溶液或水凝胶纳米粒子溶液。

3.如权利要求1所述的一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的制备方法，其特征在于：步骤一所述过滤的具体步骤如下：将滤膜层(1)置于可拆卸滤器中，通过注射器将纳米粒子溶液注入可拆卸滤器中，在滤膜层(1)上自组装形成有序结构，得到单分散纳米粒子层(2)。

4.如权利要求1所述的一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的制备方法，其特征在于：步骤三所述的无电解电镀沉积法的具体步骤为：取出覆盖有金纳米粒子层的滤膜层 (1)，烘干后将其浸入等体积混合有无电解电镀A液和无电解电镀B液的混合液中反应1～60min，以金纳米粒子层中金纳米粒子为核生长金属，制得镀金属层(3)，得到检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底；当镀金属层(3)为镀金层时，无电解电镀A液由0.1～10g/mL的氯化钠溶液与0.1～10wt％的氯金酸溶液按照体积比1:1～1:10混匀而成，无电解电镀B液每100mL中含有0.1～10g酒石酸钾钠、1～20g氢氧化钠、1～30mL乙醇，剩余成分为去离子水；当镀金属层(3)为镀银层时，无电解电镀A液为硝酸银与1～10vol％氨水按照质量体积比1:1～1:100混合得到的溶液，无电解电镀B液1～50wt％酒石酸钾钠溶液。

5.一种如权利要求1～4任一所述制备方法制备得到的检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的使用方法，其特征在于：将上述检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底用于检测那西肽成品中的链霉菌菌丝，具体步骤如下：

步骤1、将那西肽预混剂置于1000～10000rpm的条件下离心1～30min，或者室温下静置0.5～5h，得到样品溶液；

步骤2、将步骤1得到的样品溶液滴加在所述的检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底上，静置反应1～60min，得到待检测样品(8)；

步骤3、用拉曼光谱仪(5)对待检测样品(8)进行拉曼检测，当分析激光(6)照射待检测样品(8)后得到拉曼光谱(7)，之后对拉曼光谱(7)进行分析，得出检测结果。

6.如权利要求5所述的一种检测链霉菌菌丝的增强拉曼基底的使用方法，其特征在于：所述的拉曼光谱仪为手持式拉曼光谱仪、共聚焦显微拉曼光谱仪或共振显微拉曼光谱仪。