[发明专利]一种海参内脏制备海参肽和海参多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及海参废弃物资源化利用领域，具体涉及从海参内脏中提取海参肽和海参多糖的方法。

背景技术

海参(sea cucumber)为棘皮动物门(Echinodermata)海参纲 (Holothurioider)动物的总称，是重要的海洋无脊椎动物，全世界约有1100 多种，我国海域约有140余种，海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，被列为八大珍品之一。中医认为，海参性味甘、咸、温，入心、肾精，有补肾益精、养血润燥之功效。海参体内含有海参多肽、海参多糖、脂肪、海参皂苷、维生素、脑苷脂等活性组分，具有延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤、抗凝血等活性，具有较高的药用价值和医用价值。

一般人们食用的海参都是海参体壁，而非海参内脏。在海参加工过程中，有大量的海参内脏作为下脚料被遗弃，然而海参内脏也含有丰富的蛋白质和多糖及其他多种活性成分。研究表明，海参多糖是海参体内最重要的活性物质之一，且具有抗凝血、抗肿瘤、免疫调节、延缓衰老、降血脂等多种生物活性。Lee等分别比较红海参和灰海参内脏中氨基酸的组成及含量，发现海参蛋白中含有17种氨基酸，8种必需氨基酸和9种非必需氨基酸，由此说明海参内脏可以为海参肽的制备提供优质的蛋白来源。

海参多肽具有良好的稳定性及溶解性，食用安全，易消化吸收，且具有降血压、抗疲劳、提高免疫力、抗氧化等多种生物活性。现有文献报道，海参肽的生物活性与其分子量密切相关，房堃等将酶解得到的海参肽通过超滤进行分离并研究其抗氧化活性，发现分子量在3000Da以下及3000Da 以上的海参肽均具有较强的清除超氧阴离子的活性，而3000Da以下的海参肽具有更强的清除羟自由基活性，说明不同分子量段的海参肽具有不同的生物活性。因此，从海参内脏中提取活性组分，将大大提高海参的综合开发利用价值，降低海参资源的浪费，具有显著的经济效益和社会效益。

目前，国内外专利对于海参内脏的开发均有所涉及。(1)专利 EP20110840702公开了一种海参复合制剂的制备方法，其效果好于单一制剂；(2)专利CN201210101836公开了一种以海参内脏为原料，采用生物酶解技术提取海参多糖、海参多肽的方法；(3)专利CN104137996A提供了一种海参内脏的处理加工方法，制成低分子、高活性的海参肽粉，可应用于食品及保健品领域；(4)专利CN104207088A公开了一种海参内脏蛋白制备海鲜调味品的方法，制得的产品具有独特的鲜味和香气，且富含必需氨基酸和活性多肽等营养成分，易于储藏和运输；(5)专利CN105177095A 公开了一种高效制备海参抗氧化活性肽的方法，所得海参多肽的羟自由基清除能力和总还原力明显高于目前广泛使用的抗氧化剂。

目前，专利中未见以海参内脏为原料，制备海参多糖和海参肽，同时实现海参多肽的分级分离的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺简单、设计合理的从海参内脏中同时提取海参肽和海参多糖的方法，充分利用海参加工时被丢弃的海参内脏，减少对环境的污染，达到变废为宝的目的。

为实现本发明的目的，其技术方案如下列步骤所述：

一种海参内脏制备海参肽和海参多糖的方法，包括如下步骤：

⑴预处理：将海参内脏清洗后，进行冷冻干燥，并进行粉碎，采用筛网过滤得到海参内脏粉；

⑵酶解：称取海参内脏粉并配置成溶液，溶液中海参内脏粉的质量浓度为0.5-10.0％，溶液温度25-55℃，加酶量10-100U/mg，调节溶液的pH 为6.5-8.5，进行酶解，酶解时间5.0-10h；

⑶灭酶：灭酶温度在85-95℃，灭酶时间5-20min，灭酶后冷却至室温；

⑷离心分离：将步骤(3)所得到的料液进行离心分离，得到上清液和滤渣，取上清液进行浓缩得到浓缩液；

⑸醇沉：将步骤(4)所得的浓缩液，按浓缩液与乙醇体积比为1:1-1:6 配比加入乙醇进行醇沉，静置2-12h；

⑹离心分离：将步骤(5)所得的已分层的物料离心分离，所得沉淀物为海参粗多糖，上清液进行浓缩和冷冻干燥，得到海参肽粗粉；

⑺纳滤：将步骤(6)所得的海参肽粗粉按海参肽粗粉按1-2％的浓度溶解，采用截留分子量为100Da的纳滤膜进行纳滤，压力为0.5-2.5MPa，收集浓缩液；

⑻超滤：将步骤(7)得到的浓缩液，采用截留分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，压力为1.5-2.5MPa，分别收集浓缩液和透过液，分别进行冷冻干燥，分别得到海参多肽(分子量为2000-5000Da)和寡肽(分子量<2000 Da)；