[发明专利]一种唾液乳杆菌JM55及其应用在审
申请号: | 201710159836.X | 申请日: | 2017-03-17 |
公开(公告)号: | CN107267408A | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 李龙;刘锁珠;王利红 | 申请(专利权)人: | 杨凌职业技术学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A23K50/75;A23K10/18;C12R1/225 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 712100 陕西省咸阳市*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 唾液 杆菌 jm55 及其 应用 | ||
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域,尤其涉及一种唾液乳杆菌JM55及其应用。
背景技术
随着抗生素在畜牧生产中大量使用所带来的种种弊端的日益凸显,如导致动物肠道正常菌群失调,动物整体免疫低下,产生耐药性细菌甚至发生抗生素在畜禽产品中的残留,开发替代抗生素的新型环保安全高效的绿色饲料添加剂已成为必然趋势。
近年来,益生菌替代抗生素来促生长、预防和治疗炎症性肠病成为研究的热点,益生菌因其益生特性在畜牧生产中应用前景非常广阔,但不是所有菌株都可以作为益生菌,可作为益生菌的菌株应具有以下特征:(1)正确的益生菌菌株来源;已有研究表明,理想的益生菌菌株最好来自本源动物;(2)对动物健康无负面影响,很多细菌在代谢过程中会产生毒素或类毒素等,而这些有毒的物质会影响动物的健康,因此安全性是决定一株菌能否成为益生菌的必要条件;(3)对胃肠道酸、胆盐等抑制因素有较强的耐受性,因为益生菌的使用方式多为口服,先到达胃再安全到达肠道才能发挥作用,所以益生菌首先必须具有较强的耐酸、耐胆盐和耐胰蛋白酶的特性,保证到达后肠道前不被抑制或杀死,才能发挥有益作用;(4)具有良好的抑菌活性,可抑制肠道中常见病原微生物的生长和繁殖;(5)对肠上皮细胞具有较高的粘附性,对肠上皮细胞的粘附性是其长期发挥有益作用的前提;(6)能用于生产加工并保持较强活力,性能较好的益生菌不仅在经过饲料添加剂的各种加工程序之后仍具有较好活性,还能在储存和运输过程中保持活力等;(7)用于生产的菌株还要必需符合我国农业部规定的《饲料添加剂品种目录》。目前,乳酸菌是应用最早、最广泛的益生菌,是一类能在利用碳水化合物发酵过程中产生大量乳酸的细菌的总称,通常为厌氧或兼性厌氧菌,在动物饲料中常用的有乳酸杆菌属、双歧杆菌属和肠球菌属。其中,肉鸡饲喂乳酸杆菌的研究越来越多,尤其乳酸菌制剂在肉鸡生产中得到广泛的应用,它作为一种活性制剂能够提高肉鸡生产性能和改善肠道环境。例如现有罗伊氏乳杆菌单一菌剂、卷曲乳杆菌单一菌剂及其它们的复合制剂,每克活菌含量仅为107cfu,肉鸡日增重均在50~52g;北京中农颖泰生物技术有限公司研制的高端乳酸菌微生态制剂,商品名康福特100,饲喂42天肉鸡日增重为51.97±4.75g;CN201010527172.6公开了一株植物乳杆菌及其应用,该植物乳杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄球菌等抑菌圈直径均在12.36~ 14.92之间,抑菌作用较小。同时由于饲养环境的差异,益生菌结果不一致性变得越来越复杂因此,寻找一种效果稳定、抑制效果良好、具有最佳肉鸡日增重特点、可制备活性制剂的优良乳酸菌菌种成为进一步研究的课题。
综上所述,现有技术存在的问题是:目前益生菌结果不一致、稳定性差、抑制效果差、对肠上皮细胞粘附性差对肉鸡生产性能没有显著提高作用。
发明内容
为解决现有技术存在的问题,本发明的目的在于提供一种唾液乳杆菌JM55 及其应用。
本发明是这样实现的,一种唾液乳杆菌JM55,所述唾液乳杆菌JM55保藏编号为M2016593,保藏日期为2016年11月--3日。
本发明另一目的在于提供一种包含上述的唾液乳杆菌JM55的唾液乳杆菌 JM55菌粉。
本发明另一目的在于提供一种唾液乳杆菌JM55菌粉的制备方法,所述唾液乳杆菌JM55菌粉的制备方法包括以下步骤:
(1)制备唾液乳杆菌JM55的种子液;
(2)制备发酵液:将步骤(1)中制备的种子液转接到液体培养基中,在 36℃~38℃培养12h~24h,作为发酵用菌种;
(3)扩大培养:在发酵罐中加入液体培养基,119℃~125℃灭菌15min~ 30min;灭菌完成后降温降至36~38℃;将步骤(2)中制备的发酵液以体积比为0.5%~2%的比例接种到液体培养基中;在温度36℃~38℃,转速100rpm~ 300rpm,pH 6~7,连续发酵12h~24h,即得发酵菌液;
(4)制备菌粉:将步骤(3)中所得的发酵菌液用超高速离心机以转速 6000rpm/min~8000rpm/min,离心15min~25min;弃上清液,收集菌泥,在菌泥中加入保护剂,加入量为菌泥重的8%~12%,然后搅拌均匀,冷冻干燥20h~ 30h后研成粉末状,即得唾液乳杆菌JM55菌粉。
进一步,制备唾液乳杆菌JM55的种子液具体包括:从平板上挑唾液乳杆菌 JM52的单菌落接种到MRS液体培养基,在37℃培养箱培养16h;
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