[发明专利]一种用于T1、T2双模态磁共振造影剂的磁性纳米颗粒复合物及其制备方法

权利要求书

1.一种用于T₁、T₂双模态磁共振造影剂的磁性纳米颗粒复合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1.1、OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@ mSiO₂的制备：

1.1.1、先将油酸包裹的Fe₃O₄纳米颗粒OA@ Fe₃O₄分散在环己烷中，得到OA@Fe₃O₄分散液；

1.1.2、在环己烷和Igepal^® CO-520中，加入OA@ Fe₃O₄分散液，混合均匀，然后加入氨水和正硅酸乙酯，OA@Fe₃O₄、正硅酸乙酯和Igepal^®CO-520的质量比为1:9-11: 120-140，在室温和密闭的条件下搅拌反应4-8小时，得到包裹一层实心二氧化硅的OA@ Fe₃O₄，记为OA@Fe₃O₄@nSiO₂；

1.1.3、在十六烷基三甲基氯化铵和有机碱三乙醇胺的混合水溶液中，加入OA@ Fe₃O₄@nSiO₂水分散液和正硅酸乙酯，此时体系的pH为9-10，OA@ Fe₃O₄@nSiO_2、正硅酸乙酯与十六烷基三甲基氯化铵的质量比为1：15-25：300-400，在60-100℃下反应0.5-1.5小时，得到包裹一层介孔二氧化硅的OA@ Fe₃O₄@nSiO₂，记为OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@mSiO₂；

1.2、OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@ mSiO₂@PAA-cRGD的制备：

2.1.1、将聚丙烯酸分散在pH5.0-6.0的缓冲溶液中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺和环肽c(RGDyK)，聚丙烯酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、环肽c(RGDyK)的摩尔比为1-3:0.5-1.5:1-3:0.1-1，调整体系的pH至7.0-7.5，在室温下反应10-12小时，所得的混合产物透析掉残余未反应的小分子后，得到PAA-cRGD溶液；

1.2.2、将OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@mSiO₂分散在去离子水中，加入PAA-cRGD溶液和氨水，此时体系的pH为8-10，OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@mSiO₂与PAA-cRGD的质量比为1:1.5-2.5，超声混合均匀，边搅拌边滴加异丙醇，使得PAA-cRGD沉积在OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@mSiO₂表面上，得到OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@ mSiO₂@PAA-cRGD；

1.3、5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉盐酸盐的制备：

1.3.1、在甲醇中，5,10,15,20-2-([4-叔丁基-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 卟啉与四水合乙酸锰反应，5,10,15,20-2-([4 -叔丁基-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 卟啉和四水合乙酸锰的摩尔比为1：5-10，在60-80℃下回流10-14小时，得到5,10,15,20- 2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉；

1.3.2、在二氯甲烷中，5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉与氯化氢的1,4-二氧六环溶液反应，5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉与氯化氢的摩尔比为1：50-150，室温下反应10-14小时脱去N-boc保护基团，得到5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉盐酸盐；

1.4、Mn-IOSP的制备：

将OA@ Fe₃O₄@nSiO₂@ mSiO₂@PAA-cRGD分散于装有去离子水和异丙醇的混合溶液的反应容器中，加入5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉盐酸盐溶液，OA@Fe₃O₄@nSiO₂@ mSiO₂@PAA-cRGD与5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基] 氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉盐酸盐的质量比是1：1-2，将反应容器置于摇床中，在30-40℃下混合22-26小时，得到用于T₁、T₂双模态磁共振造影剂的磁性纳米颗粒复合物，记为Mn-IOSP，所述的磁性纳米颗粒复合物为三层核-壳结构，所述的核为Fe3O4纳米颗粒，中间层为负载5,10,15,20-2-([4-苯甲酰氨基]氨基甲酸乙酯) 锰-卟啉盐酸盐的二氧化硅层，最外层为靶向整合素受体的环肽基团-cRGD的聚丙烯酸聚合物层。