[发明专利]一种DNA分子STTM‑miR482a及其应用在审
申请号: | 201710172193.2 | 申请日: | 2017-03-22 |
公开(公告)号: | CN106754932A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 栾雨时;杨广磊;崔军;姜宁;肖裕 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司21238 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116024 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 dna 分子 sttm mir482a 及其 应用 | ||
1.一种DNA分子STTM-miR482a,其特征在于:所述DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述DNA分子STTM-miR482a的应用,其特征在于,将表达DNA分子STTM-miR482a的重组表达载体用于调控植物中microRNA482a表达、调控植物抗病性。
3.根据权利要求2所述DNA分子STTM-miR482a的应用,其特征在于,所述调控的具体方法为:
将所述表达DNA分子STTM-miR482a的重组表达载体转化农杆菌GV3101并涂布在含有卡那霉素、链霉素及利福平的YEB固体培养基上,挑取单菌落进行菌液PCR验证;
选取阳性工程菌侵染预培养后的番茄子叶,共培养,分化出芽;
将抗性芽移至生根培养基中诱导生根后移栽,实时定量PCR验证即得到可调控microRNA482a表达、调控植物抗病性的转基因植物。
4.根据权利要求3所述DNA分子STTM-miR482a的应用,其特征在于,所述目的植物为双子叶植物番茄。
5.根据权利要求2所述DNA分子STTM-miR482a的应用,其特征在于,所述重组表达载体为含有DNA分子STTM-miR482a的表达载体。
6.根据权利要求5所述DNA分子STTM-miR482a的应用,其特征在于,以PBI121载体为表达载体制备表达STTM-miR482a的重组表达载体;
具体制备方法为:将所述DNA分子STTM-miR482a插入PBI121载体的Sac Ⅰ和Bam H Ⅰ之间,且插入的位置为CaMV35s启动子之后,即得到表达STTM-miR482a的重组载体。
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