[发明专利]一种检测EGFR基因突变的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201710172663.5 | 申请日： | 2017-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN106929582A | 公开（公告）日： | 2017-07-07 |
| 发明（设计）人： | 郎秋蕾;周小川;李璐璐;方超;梁洪;林彬;张瑞静 | 申请（专利权）人： | 杭州联川基因诊断技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市下沙经*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 egfr 基因突变 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，包含通用引物和特异性引物。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的通用引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的特异性引物包括：
用于扩增EGFR基因的外显子18的区域的特异性引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；
用于扩增EGFR基因的外显子19的区域的特异性引物序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；
用于扩增EGFR基因的外显子20的区域的特异性引物序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；
用于扩增EGFR基因的外显子21的区域的特异性引物序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的特异性引物可以被硫代修饰、2-氟代核糖核酸修饰、2'-O-甲基核糖核酸修饰、5-甲基脱氧胞嘧啶修饰、脱氧次黄嘌呤修饰、2-氨基嘌呤修饰、5-溴-脱氧尿嘧啶修饰、反向dT修饰、双脱氧胞苷修饰、间臂修饰、氨基修饰、巯基修饰、磷酸化修饰、生物素修饰、锁核苷酸修饰中的任意一种方式修饰，也可以是多种方式同时修饰。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR混合反应液、纯化磁珠和阳性对照。
6.一种非诊断目的的利用如权利要求1-5任一项所述的试剂盒检测EGFR基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：特异性引物与目标模板DNA序列结合、通用引物扩增待测样本目标区域，磁珠纯化文库，对得到的文库进行高通量测序并分析EGFR基因的突变。
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