[发明专利]具有示踪作用的中药

权利要求书

1.具有示踪作用的中药，其特征在于：将造影剂与中药有效成分发生反应结合为一个大分子制得。

2.根据权利要求1所述的具有示踪作用的中药，其特征在于：所述造影剂为钆喷酸葡胺，所述中药有效成分为淫羊藿苷，两者通过下述反应步骤结合：

步骤1：甘氨酸的氨基保护：

把2mmol甘氨酸溶解在20mL NaHCO₃溶液(质量分数为1.68％)中，室温下搅拌1-2h，同时，将0.45g二碳酸二叔丁基酯溶解在2mL二氧六环中，而后，在冰浴中不断搅拌的条件下，把二碳酸二叔丁基酯溶液缓慢滴加至Gly的溶液中，控制滴速，在10分钟内滴加完毕后，室温反应20h；

用0.01M HCl调节上述反应后的溶液的pH至中性，用旋转蒸发仪除去溶剂，而后将余下固体用二氯甲烷溶解，并除去不溶物(NaCl)；将DCM中溶解的反应产物滴加至10倍体积的冷乙醚中沉淀，通过抽滤收集固体产物，并用冷乙醚多次洗涤此固体产物，最后放置于真空干燥箱中干燥，即可得到叔丁氧羰基甘氨酸叔丁酯；

步骤2淫羊藿苷与叔丁氧羰基甘氨酸叔丁酯的脱水缩合反应

将淫羊藿苷加入到四氢呋喃和吡啶的混合溶液中，不断搅拌至完全溶解，加入一定量的叔丁氧羰基甘氨酸叔丁酯，剧烈搅拌1h，而后缓慢加入二环己基碳二亚胺和二甲基氨基吡啶的四氢呋喃溶液，室温下搅拌反应24h，而后，加入20mL去离子水，抽滤，洗涤，尽量除尽不溶物，通过旋蒸使溶液浓缩，再将浓缩后溶液沉淀在水中，然后将沉淀溶解于THF和吡啶的混合溶液中，加水，冷冻过夜，将不溶物除去，浓缩，加水析出沉淀,如此反复三次，得产物；

步骤3脱除叔丁氧羰基的保护

取第二步产物5g，加入至9mL三氟乙酸和10mL二氯甲烷的混合溶液中，室温下搅拌1-2h，产物旋蒸除去二氯甲烷，所得固体用乙酸乙酯溶解，用5％碳酸钠洗涤至pH＝8-9，而后除去溶剂可以得到第三步反应产物氨基淫羊藿苷；

步骤4氨基淫羊藿苷与核磁造影剂的偶联

造影剂(DTPAA-Gd)加入至蒸馏水中，而后向其中缓慢滴加氨基淫羊藿苷，淫羊藿苷的氨基与DTPAA-Gd的摩尔比为1：10，并向其中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC,浓度约为10mg/mL)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS，10mg/mL)，并将溶液pH调节至4.5，而后室温下搅拌反应20min，再将pH调节至5.5，室温下搅拌24h，而后利用柱层析分离即可得到最终产物，即与造影剂偶联的淫羊藿苷，也即具有示踪作用的中药，分子式如下

3.根据权利要求1或2所述的具有示踪作用的中药在中药药理研究中的应用，其特征在于：将该中药按照造影剂的使用方法注入人体，在核磁下成像观察中药的分布及作用。

4.根据权利要求2所述的具有示踪作用的中药在研究淫羊藿苷对软骨细胞的作用及对膝关节疾病治疗作用中的应用。