[发明专利]一种木聚糖酶突变体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710176527.3 | 申请日： | 2017-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN107142253B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 姚斌;罗会颖;游帅;王苑;涂涛;黄火清;苏小运;柏映国;王亚茹 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 11737 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 催化 效率 耐高温 聚糖 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，所述木聚糖酶突变体是将氨基酸序列全长如序列表SEQ ID NO：1所示的木聚糖酶的N端序列去掉84个氨基酸后得到的突变体，所述木聚糖酶突变体的氨基酸序列全长如序列表SEQ ID NO：3所示。
2.一种制备权利要求1所述的木聚糖酶突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将氨基酸序列全长如序列表SEQ ID NO：1所示木聚糖酶的基因插入到表达质粒pPIC9中，得到重组质粒XYL10C-pPIC9；
(2)根据目的片段设计引物，同时在引物对的5’端添加表达质粒pPIC9连接处的酶切位点，以步骤(1)中的重组质粒为模板，扩增得到N端序列去掉84个氨基酸后的木聚糖酶的编码基因；
(3)将上述得到的编码基因酶切与切开的pPIC9质粒进行连接，得到突变体重组质粒；
(4)将突变体重组质粒转化毕赤酵母GS115，诱导表达，获得N端序列去掉84个氨基酸后的木聚糖酶突变体。
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