[发明专利]可分泌抗C反应蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞、C反应蛋白检测试剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710184068.3 | 申请日: | 2017-03-24 |
公开(公告)号: | CN107022527B | 公开(公告)日: | 2019-12-27 |
发明(设计)人: | 陈洁;韩日才;覃素妮;宗雪;龚春喜;林泽萍 | 申请(专利权)人: | 菲鹏生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/18;C07K16/06;G01N33/68;G01N33/577 |
代理公司: | 44224 广州华进联合专利商标代理有限公司 | 代理人: | 生启 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区西丽留仙洞中山园路1001号T*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分泌 反应 蛋白 单克隆抗体 杂交瘤 细胞 检测 试剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种C反应蛋白检测试剂,其特征在于,包括第一抗体和第二抗体,所述第一抗体为抗C反应蛋白的兔多克隆抗体,所述第二抗体为抗C反应蛋白的单克隆抗体,所述第二抗体为所述第一抗体的配对抗体,所述第二抗体通过杂交瘤细胞株CRP2分泌得到,所述杂交瘤细胞株CRP2的保藏号为CCTCC NO:C2016218。
2.根据权利要求1所述的C反应蛋白检测试剂,其特征在于,所述第一抗体通过C反应蛋白抗原免疫兔子后提取兔子血清中的抗体得到,所述第一抗体标记为CRP-8。
3.根据权利要求2所述的C反应蛋白检测试剂,其特征在于,所述C反应蛋白抗原为重组人C反应蛋白抗原。
4.根据权利要求1所述的C反应蛋白检测试剂,其特征在于,所述第一抗体上标记有荧光微球,所述第一抗体与所述荧光微球的质量比为30~50:100。
5.一种C反应蛋白检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1~4任一项所述的C反应蛋白检测试剂。
6.一种C反应蛋白检测试剂的制备方法,所述C反应蛋白检测试剂包括第一抗体和第二抗体,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
用C反应蛋白抗原分别免疫兔子和小鼠;
提取免疫后兔子血清中的抗体,纯化后获得第一抗体,所述第一抗体为抗C反应蛋白的兔多克隆抗体;
收集免疫后小鼠的脾细胞,并将所述脾细胞与小鼠瘤细胞进行融合,筛选获得能够分泌抗C反应蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞;以及
将多株所述杂交瘤细胞分泌得到的抗C反应蛋白的单克隆抗体分别与所述第一抗体进行抗体配对,并采用双抗体夹心筛选获得与所述第一抗体配对的抗体,得到所述第二抗体;所述第二抗体通过杂交瘤细胞株CRP2分泌得到,所述杂交瘤细胞株CRP2的保藏号为CCTCCNO:C2016218。
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